流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CsA及FK506對(duì)腎移植患者Th亞群的影響.pdf

1、目的： 通過(guò)與健康人群比對(duì)分析，研究腎移植患者術(shù)后Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的分化情況以及兩種抗排斥藥物(CsA，F(xiàn)K506)對(duì)Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的影響，了解這兩種常用的鈣調(diào)磷酸酶抑制劑免疫調(diào)節(jié)作用的異同，以求正確評(píng)估兩藥在抗排斥反應(yīng)的差別，為患者預(yù)防排斥反應(yīng)及為腎移植術(shù)后制定更加合理的免疫抑制方案提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： 分成三組：健康對(duì)照組(n=48)、CsA組(n=21)、FK506組(n=22)。抽取靜脈全

2、血，以肝素鈉抗凝，用佛波酯(PMA)和離子霉素(Ionomycin)刺激T淋巴細(xì)胞4小時(shí)，用熒光標(biāo)記的抗CD3和CD8單克隆抗體與T細(xì)胞表面上相應(yīng)的抗原分子相結(jié)合，溶血、通透后加入抗IFN-γ與IL-4抗體，同含相應(yīng)細(xì)胞內(nèi)抗原的淋巴細(xì)胞相結(jié)合。運(yùn)用流式細(xì)胞儀選定CD3+淋巴細(xì)胞，再以CD3+淋巴細(xì)胞設(shè)門，門內(nèi)用CD8與IFN-γ或CD8與IL-4分別建立雙參數(shù)直方圖，找出CD3+/CD8-/IFN-γ+細(xì)胞(Th1細(xì)胞)和CD3+/CD

3、8-/IL-4+細(xì)胞(Th2細(xì)胞)。以百分率表示Th1和Th2占總T細(xì)胞比率。結(jié)果使用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞分化情況，并分析CsA與FK506兩種免疫抑制劑對(duì)腎移植患者Th1和Th2細(xì)胞的影響。 結(jié)果： 1．所有腎移植患者Th1細(xì)胞占總T細(xì)胞的百分率(14.25±2.10)低于健康對(duì)照組Th1細(xì)胞百分率(15.76±2.74)，與健康對(duì)照組對(duì)比有明顯差異(P<0.05)

4、。FK506藥前的Th1細(xì)胞百分率(13.54±2.20)明顯低于健康對(duì)照組，與健康對(duì)照組有非常顯著的差異(P<0.05)，但CsA藥前的Th1細(xì)胞百分率(14.99±1.73)減少的不明顯，與健康對(duì)照組無(wú)顯著性意義(P>0.05)，并且FK506藥前Th1與CsA藥前的Th1百分率相比有顯著性意義(P<0.05)。所有腎移植患者Th2細(xì)胞百分率(1.15±0.45)、CsA藥前Th2(1.19±0.56)、FK506藥前Th2細(xì)胞百分

5、率(1.12±0.33)稍低于健康對(duì)照組(1.28±0.56)，但幾組之間無(wú)顯著性意義(P>0.05)。 2．CsA藥后Th1(8.48±1.01)與FK506藥后Th1(8.16±1.51)都有明顯下降，但二者比較無(wú)顯著性意義(P>0.05)；CsA藥后Th2(1.21±0.54)與FK506藥后Th2(1.16±0.25)相比無(wú)顯著性意義(P>0.05)。 3．CsA藥后Th1細(xì)胞百分率明顯低于CsA藥前，兩者之間比

6、較有顯著性意義(P<0.05)，同樣，F(xiàn)K506藥后Th1細(xì)胞百分率也明顯低于FK506藥前，兩者之間比較有明顯差異(P<0.05)。CsA藥前與CsA藥后Th2及FK506藥前與FK506藥后Th2相比均無(wú)顯差異(P>0.05)。 4．CsA藥前、藥后Th1細(xì)胞百分率的差(6.52±1.44)大于FK506藥前、藥后Th1細(xì)胞百分率的差(5.38±1.67)，并且兩者比較后有顯著性意義(P<0.05)。 結(jié)論：