肝癌患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及其免疫狀態(tài)的研究.pdf

1、一、兩種方法檢測(cè)肝癌患者外周血中CD4+CD25hi-intTreg水平的關(guān)系及意義
　　 目的:在已有的以標(biāo)記CD4+CD25hi-int CD127low標(biāo)記Treg的基礎(chǔ)上,建立以CD4+CD25hi-intFoxp3+標(biāo)記Treg的方法,并觀察二者之間的相關(guān)性；初步探討肝細(xì)胞肝癌(HCC)患者外周血中Treg的水平；為進(jìn)一步的研究奠定基礎(chǔ)。
　　 方法：采用流式細(xì)胞術(shù),分別用CD127low和Foxp3+兩種標(biāo)記

2、方法檢測(cè)31例HCC患者外周血的Treg水平,檢測(cè)32例健康對(duì)照組CD4+CD25hi-intFoxp3+Treg水平。
　　 結(jié)果：建立了穩(wěn)定可靠的檢測(cè)核轉(zhuǎn)錄因子Foxp3的方法,用Foxp3+和CD127low兩種標(biāo)記方法檢測(cè)HCC患者外周血中Treg占CD4+T細(xì)胞分別為(10.33±4.47)％和(10.51±4.78)％,兩者之間呈正相關(guān),Pearson相關(guān)系數(shù)為0.889,P<0.01,相關(guān)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩者曲線(xiàn)擬合

3、提示冪模型是最優(yōu)模型,建立回歸方程Y=1.236x(x0.899)(Y為Foxp3+Treg,x為CD127lowTreg)。HCC患者與健康對(duì)照組外周血中CD4+CD25hi-intFoxp3+Treg占CD4+T細(xì)胞的比例分別為(10.33±4.47)％和(7.34±1.76)％,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：在已有的以標(biāo)記CD4+CD25hi-intCD127low標(biāo)記Treg的基礎(chǔ)上,建立了以Foxp3+標(biāo)記Treg的

4、方法,這種方法分群較好,結(jié)果穩(wěn)定,且為T(mén)reg的特異性檢測(cè)方法。兩種檢測(cè)方法所得Treg數(shù)值之間呈正相關(guān),表明可用CD127進(jìn)行Treg的臨床檢測(cè),兩者之間的數(shù)值轉(zhuǎn)換可以通過(guò)冪模型。HCC患者外周血中Foxp3+Treg的水平升高。
　　 二、乙肝肝癌患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和免疫狀態(tài)的分析
　　 目的:探討乙肝肝癌患者外周血中CD4+CD25hi-intFoxp3+Treg水平及其他免疫狀態(tài)的變化。
　　 方法：

5、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)46例乙肝肝癌患者、21例乙肝肝硬化患者及32例健康對(duì)照者外周血中CD4+CD25hi-intTreg水平,并同時(shí)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)這些乙肝肝癌和乙肝肝硬化患者外周血和7例健康對(duì)照中γδ T細(xì)胞(CD3+CD4-CD8-)、輔助性T細(xì)胞(CD3+CD4+CD8-)、細(xì)胞毒T細(xì)胞(CD3+CD4-CD8+)、總T細(xì)胞(CD3+CD19-)、自然殺傷T細(xì)胞(CD3+CD1CCD56+)、自然殺傷細(xì)胞(CD3-CD16+CD56+)

6、、白細(xì)胞共同抗原(CD45+)、CD4+/CD8+T細(xì)胞比例表達(dá)率。
　　 結(jié)果：HCC組、LC組、對(duì)照組外周血中CD4+CD25hi-intFoxp3+Treg占CD4+T細(xì)胞的比率分別為(9.21±2.07)％、(8.13±0.69)％和(7.34±1.76)％,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。外周血免疫狀態(tài)分析顯示:NKT細(xì)胞在對(duì)照組、LC組和HCC組的比例分別是(7.09±3.24)％、(7.56±4.70)％和(11.93±8.04

7、)％；NK細(xì)胞在對(duì)照組、LC組和HCC組的比例分別是(30.13±8.58)％、(10.46±8.06)％和(11.25±8.53)％；CD45+細(xì)胞在對(duì)照組、LC組和HCC組的比例分別是(19.82±4.46)％、(10.65±4.59)％和(10.79±7.28)％；CD4+細(xì)胞在對(duì)照組、LC組和HCC組的比例分別是(27.56±3.36)％、(35.06±7.72)％和(32.88±8.41)％；CD8+T細(xì)胞在對(duì)照組、LC組和H

8、CC組的比例分別是(25.01±8.47)％、(13.63±7.04)％和(20.19±9.94)％；CD4+/CD8+比例在對(duì)照組、LC組和HCC組的比例分別是(1.22±0.45)％、(2.98±1.23)％和(1.86±0.77)％；上述項(xiàng)目的方差分析提示差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。γδ T細(xì)胞和總T細(xì)胞三組之間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論：肝癌患者外周血Foxp3+Treg細(xì)胞占CD4+T淋巴細(xì)胞的比率明顯升高。肝癌患者體內(nèi)存在