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1、目的:研究微波消融原位瘤苗聯(lián)合調(diào)節(jié)性T細(xì)胞清除對(duì)小鼠抗肝癌免疫的影響。方法:通過(guò)小鼠皮下注射Hepa1-6肝癌細(xì)胞建立小鼠皮下肝癌模型,將小鼠分為單純消融組(MWA組)、消融聯(lián)合細(xì)胞因子緩釋微球組(ISV組)、消融聯(lián)合調(diào)節(jié)性T細(xì)胞清除組(MWA+Treg depletion組)、消融聯(lián)合細(xì)胞因子緩釋微球及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞清除組(ISV+Treg depletion組)4組,對(duì)各組進(jìn)行相應(yīng)干預(yù),待腫瘤消退1個(gè)月后在對(duì)側(cè)皮下再次接種等量Hepa
2、1-6肝癌細(xì)胞再刺激,2周后取小鼠外周血,分離單核細(xì)胞行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD4+T細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在外周血淋巴細(xì)胞中所占比例的變化。取小鼠脾臟行免疫組化檢測(cè)CD8+T細(xì)胞及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量的變化,分離脾臟淋巴細(xì)胞與滅活的Hepa1-6細(xì)胞共培養(yǎng),ELISPOT法檢測(cè)淋巴細(xì)胞分泌INF-γ的情況。
結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠外周血CD4+T細(xì)胞占淋巴細(xì)胞比例,MWA組占12.50%,ISV組占13.30%,MWA+Treg d
3、epletion組占16.65%,ISV+Tregdepletion組占24.22%。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞占淋巴細(xì)胞比例,MWA組占2.50%,ISV組占2.37%,MWA+Treg depletion組占2.24%,ISV+Treg depletion組占1.83%。免疫組化觀(guān)察各組脾臟中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量,ISV+Treg depletion組調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量少于ISV組及MWA+Treg depletion組,ISV組及MWA+Treg d
4、epletion組調(diào)節(jié)性T細(xì)胞明顯少于MWA組;脾臟CD8+T細(xì)胞數(shù)量ISV+Treg depletion組高于其他三組,MWA組數(shù)量最少。ELISOT檢測(cè)INF-γ分泌:ISV+Treg depletion組為292 IFN-γSFCs/106;MWA+Treg depletion組為55 IFN-γSFCs/106;ISV組為30 IFN-γSFCs/106;MWA組為18IFN-γSFCs/106。ISV+Treg depleti
5、on組IFN-γ分泌要多于MWA+Treg depletion組(P<0.05),ISV組(P<0.05)及MWA組(P<0.05)。MWA+Treg depletion組IFN-γ分泌多于ISV組(P<0.05)及MWA組(P<0.05)。ISV組IFN-γ分泌多于MWA組(P<0.05)。
結(jié)論:微波消融原位瘤苗聯(lián)合全身調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞清除可有效減少調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量,促進(jìn)淋巴細(xì)胞INF-γ的釋放,增強(qiáng)小鼠的抗肝癌免疫。
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