中藥水提物對痤瘡丙酸桿菌體外抑制作用及對兔耳痤瘡模型的療效研究.pdf

1、 目的：分別提取十九種中藥的水提物,觀察其對痤瘡丙酸桿菌標準株及臨床株的體外抑制作用,從中篩選出對痤瘡丙酸桿菌具有體外抑制作用的中藥水提物,并將篩選出的藥物外用于兔耳痤瘡模型進行療效及不良反應觀察,從而為今后臨床上痤瘡的治療提供一些新的可供選擇的藥物。方法：1.采集痤瘡患者皮損內容物,37°C厭氧培養(yǎng)48小時后,采用耐氧實驗、革蘭氏染色鏡檢、觸媒實驗、硝酸鹽實驗、糖發(fā)酵實驗等系列生化實驗以及ANI厭氧菌鑒定卡,VITEK全自動微生物鑒

2、定儀鑒定為痤瘡丙酸桿菌。2.經查閱文獻[3-4]后選擇臨床上使用頻率較高的19種中藥(黃柏、黃芩、大黃、金銀花、苦參、連翹、地膚子、白頭翁、百花蛇舌草、魚腥草、馬齒莧、旱蓮草、紫草、板藍根、大青葉、蒲公英、車前子、白芷、蛇床子)各 20g,分別加水浸泡、煎煮、過濾、濃縮配制成 20ml(相當于原藥濃度1g/ml) 的中藥水提物。3.配制含不同濃度的19種中藥水提物的改良GAM培養(yǎng)平板,以瓊脂稀釋法檢測各種藥物的MIC,篩選出對痤瘡丙酸桿

3、菌有體外抑菌作用的中藥水提物；同時檢測臨床上治療痤瘡常用的4種抗生素的 MIC,以了解痤瘡丙酸桿菌的耐藥情況。4.選取健康雄性家兔(普通級)7 只,采用 Kligman 法造模,將煤焦油外涂于兔耳的雙側耳管開口2cm×2cm處,每日1次,連續(xù)2周,于造模第7天時皮下注射痤瘡丙酸桿菌菌懸液,濃度為 1.0×108CFU/ml,每側約 50ul。造模成功后以隨機分組方式將14只兔耳分為7組,每組2只,其中6組擦拭中藥水提物,第7組1只兔耳擦

4、拭夫西地酸乳膏,另1只擦拭生理鹽水進行對照,每日1次,分別于第7天、第14天、第21天觀察其療效及不良反應。結果：1.從80 例痤瘡患者皮損處分離培養(yǎng)并鑒定出痤瘡丙酸桿菌 27 例,陽性率為33.75%,性別、年齡無統(tǒng)計學差異。2.黃柏、黃芩、大黃的MIC為25 mg/ml；金銀花、苦參的MIC為50 mg/ml；連翹的MIC為100 mg/ml；地膚子、白頭翁、百花蛇舌草、魚腥草、馬齒莧、旱蓮草、紫草、板藍根、大青葉、蒲公英、車前子、

5、白芷、蛇床子13味中藥在最高濃度200 mg/ml進行測試時仍未產生抑菌作用。3.甲硝唑MIC50為16μg/ml,MIC90為128μg/ml,耐藥率為78.57%?？肆置顾豈IC50為4μg/ml, MIC90為16μg/ml,耐藥率為 28.57%。阿奇霉素 MIC50 為 2μg/ml,MIC90 為 8μg/ml,耐藥率為21.42%。羅紅霉素MIC50為 1μg/ml,MIC90為 64μg/ml,耐藥率為46.42%。4.

6、兔耳在涂煤焦油7天后,局部增厚,變硬,毛孔變粗大,毛囊口增大并開放隆起,可見白色粉刺及黑色角栓。第14天時可見紅色炎性丘疹及少許膿皰。5.經分別擦拭黃柏、黃芩、大黃、金銀花、苦參、連翹六種中藥水提物治療7天后的兔耳紅腫減輕,部分消退,14天后兔耳厚度變薄,柔軟度有所增加,21天后局部毛囊口角栓及丘疹、粉刺減少變平。未見紅斑、脫屑等不良反應；外用夫西地酸乳膏治療后的兔耳紅腫消退,而擦拭生理鹽水的兔耳與治療前相比未見明顯變化。結論：1.黃柏