對PARP-1有潛在抑制作用的中藥單體對HUVEC PARP-1表達(dá)抑制作用的研究.pdf

1、研究目的： 利用計(jì)算機(jī)虛擬篩選對PARP-1有潛在抑制作用的中藥單體，研究對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)多聚ADP核糖聚合酶(Poly(ADP—ribose) polymerase-1，PARP-1)表達(dá)的抑制作用。初步探討其作用機(jī)制，開發(fā)低毒、高效的天然藥物，為治療糖尿病神經(jīng)病變、腫瘤等疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法： 在中國天然產(chǎn)物數(shù)

2、據(jù)庫(Chinese Natural Product Database，CNPD)中通過計(jì)算機(jī)虛擬篩選初步得到了對PARP有潛在抑制作用的34種中藥單體，找到了6種，以O(shè)NOO—激活人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的PARP-1，western blot法檢測其蛋白表達(dá)水平，同時(shí)觀察藥物的抑制作用。用MTT法進(jìn)一步探討對PARP-1有抑制作用的單體藥物對細(xì)胞活性的影響。 研究結(jié)果： 1.ONOO—200 uM作用2小時(shí)，鏡

3、下觀察細(xì)胞狀態(tài)良好，3-AB10-4M對PARP-1的激活有明顯的抑制作用。以O(shè)NOO—200 uM作用于HUVEC2小時(shí)作為篩選PARP-1的模型。 2.人參皂甙Re對PARP-1的表達(dá)有明顯的抑制作用，且呈現(xiàn)出濃度依賴性。Rb1僅在10-4M對PARP-1有抑制作用。其余藥物未觀察到明顯的抑制作用。 3.人參皂苷Re對H2O2引起的細(xì)胞損傷有保護(hù)效應(yīng)，且呈現(xiàn)出濃度依賴性，而人參皂苷Rb1對H2O2引起的HUVEC細(xì)胞