VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑對兔耳增生性瘢痕抑制作用的實驗研究.pdf

1、目的：建立新西蘭大白兔增生性瘢痕動物模型，采用血管內(nèi)皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑對瘢痕局部注射，觀察其對增生性瘢痕新生毛細(xì)血管及I型膠原在兔耳瘢痕表達(dá)的影響。為血管內(nèi)皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑對增生性瘢痕防治提供實驗和理論依據(jù)。
　　方法：新西蘭大白兔16只，隨機分為3組：動態(tài)模型組、實驗組(注射血管內(nèi)皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑)、對照組(注射生理鹽水)。動態(tài)模型組于術(shù)后6天、16天、22天、30天、56天切取兔耳瘢痕標(biāo)

2、本，采用大體觀察及形態(tài)學(xué)檢查了解創(chuàng)面愈合及瘢痕增生情況；實驗組與對照組術(shù)后10天行瘢痕內(nèi)藥物注射，其后創(chuàng)面每兩天注射1次，共6次。在術(shù)后第30天切取兔耳瘢痕標(biāo)本，采用形態(tài)學(xué)觀察瘢痕增生情況；HE染色觀察瘢痕增生指數(shù)（SEI）。免疫組織化學(xué)法檢測瘢痕組織中CD34、VEGF與bFGF變化，RT-PCR法檢測增生性瘢痕中I型前膠原mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：成功制作兔耳瘢痕模型后，大體觀察發(fā)現(xiàn)瘢痕上皮化時間約為10-15天，HE染色可

3、見成纖維細(xì)胞及膠原纖維增多，術(shù)后18天瘢痕增生明顯，突出皮面為正常皮膚的3倍。術(shù)后30天瘢痕增生達(dá)最高峰，50天左右瘢痕逐漸軟化退變。瘢痕持續(xù)時間約90-100天。經(jīng)VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑干預(yù)后的增生性瘢痕色澤變淡，厚度降低，瘢痕持續(xù)時間縮短，同期瘢痕面積明顯小于對照組（P<0.05）。HE染色顯示，實驗組鏡下染色微血管數(shù)少于生理鹽水對照組。(P<0.05)；實驗組中瘢痕增生指數(shù)與對照組比較明顯降低(P<0.05)。Masson染

4、色顯示，VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑組成纖維細(xì)胞較少，膠原稀疏并且排列較整齊，生理鹽水對照組可見大量成纖維細(xì)胞，膠原纖維粗大并成旋渦狀排列。免疫組織化學(xué)法實驗結(jié)果顯示，VEGF受體酪氨酸激酶抑制劑注射30天后CD34可見瘢痕組織中微血管的生成受到抑制（P<0.05），同時對VEGF,bFGF的表達(dá)也產(chǎn)生了明顯的抑制作用（P<0.05）。RT-PCR結(jié)果顯示，與對照組相比較，實驗組I型前膠原蛋白mRNA表達(dá)明顯降低（P<0.05）。