水母蜇傷皮膚防護劑研究.pdf

1、背景和目的：隨著經濟與社會的發(fā)展，人類與海洋的接觸日益增多。作為最常見的海洋生物傷，水母蜇傷也越來越引起人們的重視。水母蜇傷可以導致多種局部皮膚癥狀，部分毒性較強的水母還可以致人死亡。而水母刺胞、毒素生物學活性等一系列問題也并未明確。因此，開展水母蜇傷的防治研究具有十分重要的科學和現實意義。水母蜇傷的防護措施除了傳統的防護網、防護衣外，目前最有發(fā)展?jié)摿Φ木褪鞘褂梅奖愕乃蛤貍つw防護劑。水母傷人的主要毒器是刺胞，防護劑的主要研究思路便在

2、于減少、抑制刺胞發(fā)射。根據已知的刺胞發(fā)射動力理論，刺胞內部高濃度的金屬離子是提供刺胞發(fā)射的動力源頭。因此，提高刺胞周圍環(huán)境的金屬離子濃度、減小刺胞囊壁內外的金屬離子濃度差便有可能減少甚至是抑制刺胞發(fā)射?；谶@個思路，本課題選用我國東南沿海常見的有毒水母一發(fā)形霞水母(Cyanea capillata)觸手制成的刺胞混懸液(nematocyst suspension，NS)作為實驗材料，就金屬離子對刺胞發(fā)射刺絲、釋放毒素能力的影響開展了實驗

3、研究，以探討水母蜇傷皮膚防護劑的有效配方。
　　 水母的種類不同，刺胞的生物學活性也不盡相同。一種皮膚防護劑的配方較難起到廣譜的防護效果。因此，建立一種操作簡便、利于重復的水母蜇傷模型、開展水母皮炎治療藥物和方法的研究也是對皮膚防護劑研究的必要補充和支持。因此，我們采用NS和刺胞毒素(nematocyst venom，NV)代替鮮活水母觸手，制作水母蜇傷家兔模型。利用小鼠足掌腫脹模型和建立的家兔模型，我們還對H1抗組胺藥和熱敷對

4、水母皮炎的治療效果進行了評價。
　　 研究方法：第一部分：將低溫冷凍(-70℃)水母觸手置于4℃人工海水中(artificialseawater，ASW)中自溶、過濾、靜置，制備得到NS。不同種類、濃度的金屬離子溶液與NS混合，水浴震蕩，普通光學顯微鏡下觀察計數刺胞發(fā)射率(nematocystdischarge rate，NDR)。以500 mmol/L檸檬酸鈉(sodium citrate，SC)溶液為陽性對照，人工海水(ar

5、tificial seawater，ASW)為陰性對照，4℃ ASW為空白對照。
　　 不同種類、濃度的金屬離子溶液與NS混合，水浴震蕩后離心，測量上清液蛋白濃度變化。對照選擇同上。
　　 根據實驗結果選擇抑制刺胞釋放毒素能力較強的金屬離子進行組合優(yōu)化。
　　 第二部分：家兔背部脫毛。比較NS、NV通過兩種途徑(砂紙打磨破損皮膚+表面涂抹、皮內注射)造成的皮膚損傷，采用ASW為對照。處理后1 d、2 d和3 d觀

6、察皮膚紅腫情況并評分，評分后取炎癥灶皮膚組織觀察病理學變化。
　　 小鼠分別給予氯雷他定、咪唑斯汀和鹽酸西替利嗪灌胃3 d，陽性對照組給予生理鹽水灌胃。末次灌胃后測量小鼠右后足掌厚度。末次灌胃后2 h，右后足掌內注射NV0.02 ml。注射后0.5 h起，測量足掌厚度，間隔0.5 h測量一次，直至6 h。
　　 家兔背部脫毛，皮內注射NV0.1 ml(2.64 mg/m1)造成蜇傷模型。分氯雷他定灌胃、熱敷、氯雷他定灌胃

7、+熱敷以及陽性對照4組對比觀察，分別在1 d、2 d、3 d以及14 d測量各組皮膚紅斑、結痂、壞死等炎癥灶直徑(測長徑、短徑，取算術平均數)。評分后，取炎癥灶皮膚觀察病理變化。
　　 結果和結論：第一部分：低溫冷凍會對刺胞活力產生一定的影響，但是冷凍水母觸手制成的NS可以進行刺胞生物活性實驗。多個種類、濃度的金屬離子溶液對刺胞發(fā)射刺絲和釋放毒素具有不同程度的抑制作用。并且，相同濃度的金屬離子對于刺胞釋放毒素能力的抑制要強于對刺

8、胞發(fā)射刺絲能力的抑制。通過組合優(yōu)化，確定(500mmol/L LaCl3+25 mmol/L MgCl2+25 mmol/L CaCl2)的金屬離子配方為我們擬選用的水母蜇傷皮膚防護劑配方。
　　 第二部分：家兔背部皮膚皮內注射NS或NV可以模擬水母蜇傷后的臨床癥狀和病理變化，可以代替鮮活水母觸手制作蜇傷模型。氯雷他定、鹽酸西替利嗪和咪唑斯汀可以緩解NV造成的小鼠足掌腫脹，三者之間無明顯差異?？诜壤姿軌驅Πl(fā)形霞水母皮炎起到