不同治則方藥體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的研究.pdf

1、目的：探討活血化瘀法、益氣活血法和益氣法在促進(jìn)BMSCs向心肌樣細(xì)胞分化方面的差異性研究。
　　方法：48只 SD大鼠分組灌胃，腹主動脈取血制備含藥血清；50只 SD大鼠進(jìn)行BMSCs的提取、培養(yǎng)及分離純化；60只SD新生鼠進(jìn)行心肌細(xì)胞的提取、培養(yǎng)、鑒定，離心取其上清液制備條件培養(yǎng)基體外模擬大鼠心肌微環(huán)境。將制備好的條件培養(yǎng)基誘導(dǎo) CD105+-BMSCs3天后隨機(jī)分為4組加入含藥血清，西藥組直接加藥物作用于細(xì)胞。MTT法選擇各用

2、藥組的最佳倍比濃度；繪制1-7d各用藥組CD105+-BMSCs的生長曲線；流式細(xì)胞儀檢測第1-5天各用藥組CD105+-BMSCs的分裂增殖情況；免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測第1-5天各用藥組CD105+-BMSCs表達(dá)心肌特異性蛋白CTNT、GATA-4的分化情況。
　　結(jié)果：
　　（1）各用藥組CD105+-BMSCs的群體倍增時間為24h，第1、2天細(xì)胞處于潛伏適應(yīng)期，第3天細(xì)胞進(jìn)入對數(shù)生長期，第4天達(dá)到高峰，第5-7天細(xì)胞處

3、于平臺期；活血化瘀組的細(xì)胞數(shù)于第2天開始明顯高于其它用藥組和DMEM對照組且呈持續(xù)狀態(tài)；
　?。?）活血化瘀組在各時間點(diǎn)的增殖指數(shù)均為最高值，分裂代次也明顯多于其它組，第1天除外；
　?。?）正常組有心肌特異性蛋白CTNT和GATA-4的弱陽性表達(dá)，且隨時間推移變化不明顯；第1天活血化瘀組、益氣活血組、益氣組、G-CSF組、生理鹽水組均有CTNT和GATA-4弱陽性表達(dá),與DMEM對照組相比變化不大，無統(tǒng)計學(xué)意義；第2、3、