電針加灸對(duì)急性腦缺血再灌注損傷大鼠血腦屏障的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的： 目前針灸治療腦缺血病機(jī)理研究有較多報(bào)道，并且在治療腦血管疾病方面積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，但關(guān)于針灸對(duì)急性腦缺血再灌注后血腦屏障的影響的研究報(bào)道涉及較少。本課題從針灸對(duì)急性腦缺血再灌注后血腦屏障的影響著手，通過針刺腦缺血大鼠的水溝、百會(huì)穴，灸足三里穴，觀察針灸前后對(duì)血腦屏障通透性有明顯影響的相關(guān)生化指標(biāo)(S100β、NO、SOD)的改變情況，從一個(gè)層面探討針灸治療對(duì)腦缺血再灌注的機(jī)制。 方法：

2、 選用健康SD大鼠(由同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供)96只，隨機(jī)分為4組，正常組24只(6h組、12h組、24h組、48h組各6只)，假手術(shù)組24只(6h組、12h組、24h組、48h組各6只)，模型組24只(6h組、12h組、24h組、48h組各6只)，電針加灸組24只(6h組、12h組、24h組、48h各6只)。采用改良的大腦中動(dòng)脈線栓法(MCAO)制備缺血再灌模型[1]，電針加灸組在造模成功后30分鐘實(shí)施再灌注，用電針針刺百會(huì)

3、，水溝二穴，灸足三里穴，并與取材前30分鐘再治療1次(共2次)。各時(shí)相組的大鼠先分別眼球取血3ml，肝素納抗凝然后，以4000轉(zhuǎn)/分，離心10分鐘后取上清液并放入-20℃冷凍柜保存過夜，用于測(cè)定NO、S100β，SOD等指標(biāo)。每組各時(shí)相取2只大鼠直接斷頭取新鮮腦組織作TTC染色處理，計(jì)算腦梗死面積并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，另外4只大鼠以直接斷頭取新鮮腦組織的中動(dòng)脈供血區(qū)的大腦皮層，迅速置于4℃，2.5％戊二醛中過夜，并用H-600透射電鏡切片進(jìn)

4、行圖像觀察，測(cè)試數(shù)據(jù)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果： 1．大腦中動(dòng)脈缺血再灌注可明顯損害大鼠的正常行為活動(dòng)。模型組與電針加灸組大鼠神經(jīng)體征均有明顯改善，但兩組間比較有顯著性差異(P＜0．05)。 2．腦缺血再灌后的腦組織經(jīng)TTC染色可見缺血區(qū)有明顯的梗死灶，電針加灸能減輕缺血再灌后腦梗死體積，與模型組相比有顯著性差異(P＜0．01)。其中6h電針加灸組治療組較24h組和48h組治療效果明顯且有統(tǒng)計(jì)學(xué)

5、意義(P＜0.05)。 3．S100β酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和NO硝酸還原酶法試驗(yàn)結(jié)果顯示模型組腦缺血再灌后缺血清中NO、S100β、表達(dá)均增高；電針加灸組NO、S100β表達(dá)均較低，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)；電針加灸組NO、S100β與正常組差異不明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；SOD測(cè)定實(shí)驗(yàn)顯示模型組中SOD含量測(cè)定明顯較電針加灸組低(P＜0.05)。以上數(shù)據(jù)測(cè)定都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 大鼠急性腦缺血再灌損傷

6、后模型組血清中NO、S100β，含量表達(dá)表均較電針加灸組高(P＜0．05)，這說明腦缺血再灌注使血腦屏障受到損害，通透性增強(qiáng)，使血液中某些有害小分子物質(zhì)趁機(jī)通過。而針灸治療可降低BBB通透性，改善微循環(huán)，從而保護(hù)BBB(P＜0.05)。模型組SOD含量表達(dá)表均較電針加灸組低(P＜0.05)，提示腦缺血再灌注使腦組織缺氧損害加重，而電針加灸治療也可以降低腦組織的缺氧程度(P＜0.05)。從電針加灸組各個(gè)時(shí)相間比較發(fā)現(xiàn)，針灸對(duì)處在急性期6小