電針加灸對急性腦缺血再灌注損傷大鼠血腦屏障的保護作用研究.pdf

1、目的： 目前針灸治療腦缺血病機理研究有較多報道，并且在治療腦血管疾病方面積累了豐富的經驗，具有較高的臨床應用價值，但關于針灸對急性腦缺血再灌注后血腦屏障的影響的研究報道涉及較少。本課題從針灸對急性腦缺血再灌注后血腦屏障的影響著手，通過針刺腦缺血大鼠的水溝、百會穴，灸足三里穴，觀察針灸前后對血腦屏障通透性有明顯影響的相關生化指標(S100β、NO、SOD)的改變情況，從一個層面探討針灸治療對腦缺血再灌注的機制。 方法：

2、 選用健康SD大鼠(由同濟醫(yī)科大學動物實驗中心提供)96只，隨機分為4組，正常組24只(6h組、12h組、24h組、48h組各6只)，假手術組24只(6h組、12h組、24h組、48h組各6只)，模型組24只(6h組、12h組、24h組、48h組各6只)，電針加灸組24只(6h組、12h組、24h組、48h各6只)。采用改良的大腦中動脈線栓法(MCAO)制備缺血再灌模型[1]，電針加灸組在造模成功后30分鐘實施再灌注，用電針針刺百會

3、，水溝二穴，灸足三里穴，并與取材前30分鐘再治療1次(共2次)。各時相組的大鼠先分別眼球取血3ml，肝素納抗凝然后，以4000轉/分，離心10分鐘后取上清液并放入-20℃冷凍柜保存過夜，用于測定NO、S100β，SOD等指標。每組各時相取2只大鼠直接斷頭取新鮮腦組織作TTC染色處理，計算腦梗死面積并進行統(tǒng)計學處理，另外4只大鼠以直接斷頭取新鮮腦組織的中動脈供血區(qū)的大腦皮層，迅速置于4℃，2.5％戊二醛中過夜，并用H-600透射電鏡切片進

4、行圖像觀察，測試數(shù)據(jù)用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學處理。 結果： 1．大腦中動脈缺血再灌注可明顯損害大鼠的正常行為活動。模型組與電針加灸組大鼠神經體征均有明顯改善，但兩組間比較有顯著性差異(P＜0．05)。 2．腦缺血再灌后的腦組織經TTC染色可見缺血區(qū)有明顯的梗死灶，電針加灸能減輕缺血再灌后腦梗死體積，與模型組相比有顯著性差異(P＜0．01)。其中6h電針加灸組治療組較24h組和48h組治療效果明顯且有統(tǒng)計學

5、意義(P＜0.05)。 3．S100β酶聯(lián)免疫吸附試驗和NO硝酸還原酶法試驗結果顯示模型組腦缺血再灌后缺血清中NO、S100β、表達均增高；電針加灸組NO、S100β表達均較低，與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)；電針加灸組NO、S100β與正常組差異不明顯，無統(tǒng)計學意義；SOD測定實驗顯示模型組中SOD含量測定明顯較電針加灸組低(P＜0.05)。以上數(shù)據(jù)測定都有統(tǒng)計學意義。 結論： 大鼠急性腦缺血再灌損傷

6、后模型組血清中NO、S100β，含量表達表均較電針加灸組高(P＜0．05)，這說明腦缺血再灌注使血腦屏障受到損害，通透性增強，使血液中某些有害小分子物質趁機通過。而針灸治療可降低BBB通透性，改善微循環(huán)，從而保護BBB(P＜0.05)。模型組SOD含量表達表均較電針加灸組低(P＜0.05)，提示腦缺血再灌注使腦組織缺氧損害加重，而電針加灸治療也可以降低腦組織的缺氧程度(P＜0.05)。從電針加灸組各個時相間比較發(fā)現(xiàn)，針灸對處在急性期6小