左心室去負(fù)荷心臟心肌梗死后組織修復(fù)過程研究.pdf

1、研究目的：心肌梗死后心室內(nèi)壓力和容量負(fù)荷對(duì)梗死區(qū)的組織修復(fù)過程有重要影響。負(fù)荷過高易導(dǎo)致梗死區(qū)膨展和心室擴(kuò)張，乃至心臟破裂；而降低壓力和容量荷后則有利于組織修復(fù)。但是，完全去除壓力和容量負(fù)荷的影響后，心肌梗死區(qū)的組織修復(fù)如何進(jìn)行，尚未見到相關(guān)研究。此外，目前尚無一種方法能夠定量描述心肌梗死后組織修復(fù)過程中膠原纖維二維分布的動(dòng)態(tài)演變，因此本研究的第二個(gè)目的是嘗試建立一種新方法以定量評(píng)價(jià)梗死區(qū)膠原纖維的分布特點(diǎn)。 研究?jī)?nèi)容與方法：利

2、用Lewis大鼠之間無免疫排異的特點(diǎn)，在腹腔異位心臟移植的基礎(chǔ)上，同時(shí)結(jié)扎供體心臟的冠狀動(dòng)脈引起心肌梗死，建立一種“左心室去負(fù)荷心肌梗死”模型。在模型建立后第3天，7天，14天和35天分別處死一批動(dòng)物，動(dòng)態(tài)研究供體心臟在完全去除壓力和容量負(fù)荷后梗死區(qū)的組織修復(fù)過程。同時(shí)建立Lewis大鼠原位心肌梗死模型，在相同時(shí)點(diǎn)與移植心臟梗死區(qū)的組織修復(fù)過程進(jìn)行橫向比較。采用苦味酸天狼猩紅.偏振光法對(duì)心肌梗死區(qū)膠原纖維沉積量、成熟程度的動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行病

3、理學(xué)分析。利用加利福尼亞大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程系編寫的Continuity軟件對(duì)梗死區(qū)膠原纖維角度向量進(jìn)行自動(dòng)識(shí)別并結(jié)合有關(guān)圓分布統(tǒng)計(jì)分析方法，篩選與膠原纖維二維分布動(dòng)態(tài)變化一致的統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)。采用免疫熒光染色對(duì)梗死區(qū)新生小動(dòng)脈密度進(jìn)行病理學(xué)分析。利用凝集素?zé)晒馊旧珜?duì)非梗死區(qū)心肌細(xì)胞橫截面積進(jìn)行動(dòng)態(tài)分析。利用明膠酶譜法檢測(cè)梗死區(qū)基質(zhì)金屬蛋白酶-2和-9(MatrixMetalloproteinase，MMP)活性的動(dòng)態(tài)變化。以Westernbl

4、ot法檢測(cè)梗死區(qū)MMP-2、MMP-9，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-1(TransformingGrowthFactorβ-1，TGF-β1)和基質(zhì)衍生因子-1(StromalDerivedFactor-1，SDF-1)的蛋白相對(duì)含量。 結(jié)果：經(jīng)膠原纖維角度自動(dòng)識(shí)別結(jié)合圓分布統(tǒng)計(jì)分析后，反映膠原纖維角向量圓分布離散趨勢(shì)的3個(gè)統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)(圓分布方差、圓分布標(biāo)準(zhǔn)差和離散常數(shù))與心肌梗死后的不同時(shí)點(diǎn)間呈負(fù)相關(guān)。反映膠原纖維角向量圓分布集中趨勢(shì)的兩

5、個(gè)統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)(平均合成長(zhǎng)度、圓分布集中常數(shù))與心肌梗死后的不同時(shí)點(diǎn)間呈正相關(guān)。故上述5個(gè)參數(shù)能夠定量描述梗死區(qū)膠原纖維二維排列由紊亂向有序的動(dòng)態(tài)發(fā)展過程。移植心臟梗死區(qū)隨時(shí)間延續(xù)，膠原纖維排列紊亂程度呈進(jìn)行性增加的趨勢(shì)。利用上述5個(gè)參數(shù)，可定量描述這一過程。移植心臟梗死區(qū)的膠原合成量、成熟度均低于原位心肌梗死區(qū)。移植心臟梗死區(qū)小動(dòng)脈密度自術(shù)后14天起，均高于原位梗死組。移植心臟的重量和非梗死區(qū)心肌細(xì)胞橫截面積呈進(jìn)行性減小的趨勢(shì)，同時(shí)伴有

6、細(xì)胞外基質(zhì)沉積增多。至觀察終點(diǎn)時(shí)，相對(duì)與原位梗死組，移植心臟梗死區(qū)仍然存在大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。術(shù)后第14天，移植心臟梗死區(qū)MMP-9的蛋白含量和活性以及TGF-β1蛋白含量均明顯高于同一時(shí)間點(diǎn)的原位梗死組，而MMP-2和SDF-1與同一時(shí)間點(diǎn)原位梗死區(qū)相比無明顯差異。 結(jié)論：自動(dòng)角度識(shí)別結(jié)合圓分布統(tǒng)計(jì)分析，是一種能夠定量評(píng)價(jià)心肌梗死區(qū)膠原纖維二維分布的新方法。左心室去負(fù)荷狀態(tài)下，心肌梗死后的組織修復(fù)是一種以膠原纖維合成量下降、成熟