SLE血清中的IFN-α和IL-6對造血干細胞定向分化為樹突狀細胞的影響.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic Lupus Erythematosus，SLE)是一種典型的自身免疫性疾病，以體內B細胞的高度活化和大量自身抗體的產生為免疫學特征，發(fā)病機制迄今不明。樹突狀細胞(Dendritic cells， DC)是目前所知功能最強大的抗原提呈細胞(Antigen presenting cell， APC)，具有調節(jié)免疫應答和免疫耐受的雙重作用，其功能狀態(tài)與體內自身反應性T、B細胞的活化密切相關，可能在SLE的發(fā)病

2、中起重要作用。已有研究表明SLE患者的DC存在數量、表型和功能的異常，但其中的機制并不明了。SLE血清中細胞因子網絡失調，多種具有免疫調節(jié)作用的細胞因子表達異常，它們都有可能影響樹突狀細胞分化發(fā)育的過程。有研究報道，SLE患者體內高表達的IFN-α可誘導單核細胞向DC異常分化發(fā)育成熟，遞呈自身抗原，誘導自身反應性T細胞活化。然而，體內DC的來源有多種，造血干細胞也是其重要來源之一。此外，SLE血清中還存在其他許多異常表達的細胞因子，都可

3、能對DC的分化發(fā)育過程產生影響。為此，本文旨在探討SLE血清中的IFN-α對造血干細胞定向分化為DC的影響，并進一步研究SLE血清中的IL-6在DC分化發(fā)育過程中的作用。 我們首先收集SLE患者和正常人血清，用ELISA法檢測SLE血清中最常見、最可能起致病作用的細胞因子IFN-α、IL-6和IL-10的表達水平，并分析其表達水平與疾病活動度SLEDAI評分、相關免疫學指標(如血清抗dsDNA抗體和補體C3、C4水平)的相關性。

4、然后，用GM-CSF+IL-4+TNF-α方案在體外誘導磁珠分選的臍血CD34<'+>造血干細胞定向分化為樹突狀細胞，并在培養(yǎng)過程中分別加入IFN-α單獨升高、IL-6單獨升高以及IFN-α、IL-6同時升高的SLE血清，用以分析血清細胞因子對DC分化發(fā)育及其功能狀態(tài)的影響；運用流式細胞術檢測DC的表型，ELISA法檢測DC分泌細胞因子的水平，CCK-8法分析DC刺激同種異體T細胞增殖的能力，ELISA法和流式細胞術檢測DC對T細胞亞群

5、分化影響，以觀察SLE血清中的IFN-α和IL-6對造血干細胞定向分化發(fā)育為DC的異常影響。研究結果表明SLE患者血清中IFN-α、IL-6和IL-10的水平均顯著升高，并與疾病活動度SLEDAI評分呈正相關，SLE血清中的IFN-α和IL-10的水平還與抗dsDNA抗體水平呈正相關，與補體C3水平呈負相關。SLE血清中異常升高的IFN-α和IL-6均可促進DC表面MHC-Ⅱ類分子HLA-DR和共刺激分子CD80、CD86的表達，增強其

6、刺激同種異體T細胞增殖的能力，降低其分泌IL-12的水平；在對DC刺激T細胞亞群分化的影響上，IFN-α和IL-6卻發(fā)揮了不同的作用，IFN-α參與誘導的DC促進了CD3<'+>CD8<'->IFN-γ<'+> Th1細胞亞群和CD3<'+>CD8<'+>IFN-γ<'+>Tc1細胞亞群的分化以及Th1型細胞因子IFN-γ的產生，而IL-6參與誘導的DC則抑制了IFN-γ的產生，并存在抑制Th1和Tc1細胞分化的趨勢；此外，當SLE血清

7、中出現IFN-α和IL-6同時升高時，IFN-α與IL-6發(fā)揮相似的作用，促進DC的表型成熟，增強其刺激T細胞增殖的能力，抑制其分泌IL-12，但兩者并未顯示協(xié)同或疊加效應；關于IFN-α和IL-6在對所誘導的DC刺激T細胞亞群分化中的相互作用，則顯示IFN-α可拮抗IL-6的效應，使其所誘導的DC刺激T細胞亞群分化時表現為Th1和Tc1細胞增多和IFN-γ水平升高的趨勢。綜合上述，本研究顯示SLE血清中顯著升高的IFN-α和IL-6對