臍血單個核細胞分化為樹突狀細胞的研究.pdf

1、目的：通過兩步法分別研究兩種不同細胞因子組合FST組(FL+SCF+TPO)、FST6組(FL+SCF+TPO+IL-6)誘導臍血單個核細胞(CB-MNC)分化為樹突狀細胞(DC)的可行性及比較兩者誘導擴增的效率,試圖建立DC高效擴增體系。
　　方法：以健康孕婦的臍血為DC來源,采用兩種不同細胞因子組合FST組(FL+SCF+TPO)、FST6組(FL+SCF+TPO+IL-6)誘導擴增DC。采用倒置顯微鏡對細胞進行形態(tài)學觀察、流

2、式細胞儀檢測其誘導擴增的DC表面分子表達、混合淋巴細胞反應(MLR)及ELISA法檢測誘導擴增后獲取的DC培養(yǎng)液上清中分泌IL-12、IL-10的濃度研究擴增后的DC細胞功能,比較同等條件下兩組間誘導產生DC的效率。
　　結果:
　　1.上述兩組不同細胞因子組合均能成功誘導出DC:FST組培養(yǎng)的DC表面分子表達分別為CD1a(11.83±3.45)％、CD83(31.15±8.35)%、CD11c(95.18±2.92)%、

3、CD40(93.10±5.26)%、CD86(86.24±7.17)%;FST6組培養(yǎng)的DC表面分子表達分別為CD1a(13.62±4.05)%、CD83(27.82±8.81)%、CD11c(83.29±5.31)%、CD40(85.30±6.85)%、CD86(78.86±2.23)%。
　　2.FST組經(jīng)上述條件培養(yǎng)所收獲上述表型的細胞(2.03±0.13)×106個,FST6組收獲上述表型的細胞(2.58±0.11)×10

4、6個細胞,兩組間所收獲的DC數(shù)量比較,FST6組誘導DC的效率較FST組高(P<0.05)。
　　3.上述兩組擴增體系所誘導的DC具有典型的樹突樣突起,形態(tài)上相似。FST組誘導獲得的DC與外周血非貼壁細胞在1:80、1:40、1:20、1:10的比列混合培養(yǎng)情況下放射性核素值(CPM值)分別為1660±24、8380±56、12024±32、8250±13,FST6組誘導獲得的DC與外周血非貼壁細胞在1:80、1:40、1:20、

5、1:10的比列混合培養(yǎng)情況下CPM值分別為1730±16、8053±46、11920±27、8440±31,兩組對淋巴細胞均具有激發(fā)和促增殖作用,且在1:20時刺激效應最大。FST組分泌的IL-12、IL-10分別為354.23±11.33 pg/ml、32.37±7.74pg/ml,FST6組分泌的IL-12、IL-10分別為361.77±9.31 pg/ml、30.50±5.50pg/ml,FST組和FST6組兩組培養(yǎng)的DC均能夠分