內(nèi)皮型脾臟基質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)造血干細(xì)胞分化為調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞.pdf

1、一般體外培養(yǎng)的基質(zhì)細(xì)胞由多種成分構(gòu)成.純化其中的成分有助于研究脾臟中某一具體成分在誘導(dǎo)DCs分化中的作用.因此,我們建立了原代培養(yǎng)內(nèi)皮型脾臟基質(zhì)細(xì)胞(Endothelial Splenic Stroma Cells,ESSC)的方法.以該方法為基礎(chǔ),我們發(fā)現(xiàn)在ESSC存在的情況下,成熟DC可以進(jìn)一步增殖,并分化為具有調(diào)節(jié)功能的DiffDC.那么,ESSC是否具有從早期原始的造血前體誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性DCs發(fā)育的能力呢?由于DCs共前體的發(fā)現(xiàn)是建

2、立在已知DC亞群的基礎(chǔ)上,是否還有新的亞群,已知的共同前體是否能發(fā)育成新的亞群并不明確.因此,我們決定觀察ESSC是否能從HSC開始誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性DCs發(fā)育.我們將Lin-Flt3-CD117+Sca-1+HSC接種到ESSC上,以觀察HSC在其上的變化.結(jié)果發(fā)現(xiàn)它們迅速增殖,逐漸由小圓形變成大而多刺的非黏附細(xì)胞,至培養(yǎng)的第十天左右呈現(xiàn)典型的DC形態(tài).為探討CD11b<'hi>Ia<'lo>DC的抗原遞呈能力,我們將CD11b<'hi>Ia

3、<'lo>DC與對OVA<,323-339>抗原肽特異反應(yīng)的CD4+T細(xì)胞在OVA<,323-339>肽存在的條件下共培養(yǎng),結(jié)果發(fā)現(xiàn),CD11b<'hi>Ia<'lo>DC刺激的T細(xì)胞的相對細(xì)胞數(shù)和不用任何DC刺激的單一CD4<'+>T細(xì)胞組相似,說明其不能刺激抗原特異的CD4<'+>T細(xì)胞增殖.為了進(jìn)一步明確CD11b<'hi>Ia<'lo>DC具有活化CD4<'+>T細(xì)胞的能力,我們檢測了上述培養(yǎng)上清中細(xì)胞因子的分泌情況.結(jié)果顯示C