VentX促進(jìn)造血干細(xì)胞向紅系分化及對(duì)腫瘤干細(xì)胞分化的初探.pdf

1、非洲爪蟾蜍xvent基因同源哺乳動(dòng)物基因VentX,作為一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的造血發(fā)育調(diào)節(jié)基因，對(duì)調(diào)控造血干細(xì)胞的增殖與分化起著重要作用，此外它還參與中胚層的分化定型、細(xì)胞衰老、細(xì)胞增殖與分化及炎癥反應(yīng)等的調(diào)節(jié)。
　　GATA家族成員GATA-2，通過與靶基因的GATA結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，在造血系統(tǒng)發(fā)育中起關(guān)鍵性的調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)室前期實(shí)驗(yàn)已證實(shí)GATA-2可以結(jié)合到VentX啟動(dòng)子區(qū)兩個(gè)GATA結(jié)合位點(diǎn)來順式調(diào)控VentX,本文利用VentX和G

2、ATA-2的過表達(dá)載體和基因沉默的慢病毒，在從人骨髓中分離出的CD34+細(xì)胞中進(jìn)行了VentX和GATA-2二者的過表達(dá)或沉默，通過Western bloting檢測了VentX和GATA-2的表達(dá)水平，通過細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)和聯(lián)苯胺染色檢測等實(shí)驗(yàn)考察VentX和GATA-2對(duì)CD34+細(xì)胞增殖以及向紅系分化的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在CD34+細(xì)胞中過表達(dá)GATA-2或VentX均可抑制細(xì)胞增殖，提高紅系分化特異因子α-，β-珠蛋白的表達(dá)，促進(jìn)CD3

3、4+細(xì)胞向紅系分化。
　　腫瘤干細(xì)胞(tumor stem cells，TSCs)理論認(rèn)為TSCs是腫瘤組織內(nèi)一小部分能夠自我更新并有能力再生腫瘤的細(xì)胞，與腫瘤的形成和生長密切相關(guān)，其理論從一個(gè)全新的角度詮釋了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展本質(zhì)，給腫瘤的靶向性、根治性治療帶來了希望。但目前對(duì)TSCs的研究還處于初級(jí)階段，TSCs維持自我更新及無限增殖潛能的分子機(jī)制尚不清楚，影響TSCs多向分化潛能的相關(guān)因素也未得到完全闡明。鑒于TSCs與正常干

4、細(xì)胞有諸多相似特征和VentX基因?qū)υ煅杉?xì)胞的分化調(diào)節(jié)，本文進(jìn)行了VentX對(duì)腫瘤干細(xì)胞分化的初步探索。利用無血清懸浮培養(yǎng)富集腫瘤干細(xì)胞及在乳腺癌BT549細(xì)胞中過表達(dá)VentX,考察了VentX過表達(dá)與腫瘤干細(xì)胞比例的關(guān)系以及對(duì)干細(xì)胞標(biāo)志物ALDH1和干細(xì)胞分化重要因子Nanog、 Oct4、TGF-β表達(dá)的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在BT549細(xì)胞中，VentX的表達(dá)隨腫瘤干細(xì)胞的比例升高而增加。過表達(dá)VentX與無血清懸浮培養(yǎng)富集對(duì)ALDH