2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、在血液系統(tǒng)中,轉(zhuǎn)錄因子Tcfec主要在造血干細(xì)胞(Hematopoieticstemcells,HSCs)和多能祖細(xì)胞(Multipotentprogenitors,MPPs)中高表達(dá)。目前為止,關(guān)于Tcfec在HSCs的功能影響及機(jī)制尚不清楚。
  目的:
  1、證實(shí)Tcfec在HSCs和MPPs中的表達(dá)水平。
  2、構(gòu)建Tcfec逆轉(zhuǎn)錄病毒過表達(dá)體系。
  3、通過體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)研究過表達(dá)Tcfec對(duì)HS

2、Cs的功能影響。
  方法:
  1、分選高純度HSCs和MPPs細(xì)胞群,MySeq測序儀進(jìn)行RNA-Seq測序并獲得原始測序數(shù)據(jù)(Rawdata)。利用生物信息學(xué)技術(shù)深入分析,獲得了HSCs及MPPs細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)差異譜。
  2、q-PCR分析Tcfec在HSCs和MPPs中的表達(dá)水平。
  3、利用逆轉(zhuǎn)錄病毒過表達(dá)系統(tǒng),將小鼠Tcfec基因的開放閱讀框(Openreadingframe,ORF)構(gòu)建到過

3、表達(dá)載體,并用細(xì)胞轉(zhuǎn)染、熒光定量PCR方法驗(yàn)證過表達(dá)體系的構(gòu)建。
  4、將流式分選的陽性細(xì)胞(感染過表達(dá)病毒載體的小鼠胎肝Lin-細(xì)胞)移植到經(jīng)致死劑量輻照處理的受體鼠,構(gòu)建體內(nèi)移植動(dòng)物模型。
  5、流式細(xì)胞儀檢測移植細(xì)胞的陽性率和對(duì)骨髓造血譜系分化影響的相關(guān)檢測。
  6、流式細(xì)胞儀檢測Tcfec對(duì)HSPC細(xì)胞周期的影響。
  7、利用體外克隆形成實(shí)驗(yàn),研究Tcfec對(duì)體外克隆形成的影響效果。
  結(jié)

4、果:
  1、Tcfec在HSCs相對(duì)MPPs高表達(dá)。
  2、成功構(gòu)建Tcfec過表達(dá)載體。
  3、移植16周后,Tcfec組中陽性細(xì)胞比例占有優(yōu)勢,血細(xì)胞各譜系分化完全正常。
  4、過表達(dá)Tcfec的HSCs及MPPs細(xì)胞庫總體數(shù)量增加,但對(duì)CMP、GMP、MEP祖細(xì)胞庫無影響。
  5、Tcfec對(duì)于HSPC的細(xì)胞周期沒有影響。
  6、Tcfec組體外形成的混合細(xì)胞型克?。℅EMM)較對(duì)照

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