雄性激素受體在非雄性激素依賴型前列腺癌細(xì)胞中的促凋亡作用.pdf

1、前列腺癌在美國是發(fā)病率和死亡率都位居前列的男性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤。初發(fā)性前列腺癌的生長依賴于體內(nèi)雄性激素，被稱為雄性激素依賴型前列腺癌，臨床首選雄性激素撤除療法可收到滿意效果。但是80～90％的雄性激素依賴型前列腺癌最終都會復(fù)發(fā)為非雄性激素依賴型前列腺癌。非雄性激素依賴型前列腺癌的生長并不依賴雄性激素，同時對傳統(tǒng)的放療以及化療均不敏感。至今臨床對于該類型腫瘤的治療仍無滿意的方法。已知雄性激素依賴型前列腺癌的發(fā)病機(jī)理與雄性激素及其受體促進(jìn)細(xì)

2、胞生長，抑制細(xì)胞凋亡有密切的關(guān)系。但在最新動物模型實驗及初步臨床研究顯示，雄性激素及其受體有抑制非雄性激素依賴型前列腺癌細(xì)胞生長的作用，但其分子機(jī)制目前還不是很清楚。 本研究通過培養(yǎng)非雄性激素依賴型前列腺癌不同的細(xì)胞株，利用基因重組、基因轉(zhuǎn)染、基因干涉等實驗方法，采用免疫印跡、細(xì)胞成份分析和細(xì)胞活性及凋亡檢測等技術(shù)，探討雄性激素受體和促凋亡蛋白Bax在非雄性激素依賴型前列腺癌細(xì)胞中的關(guān)系。我們的實驗發(fā)現(xiàn)： 1.在非雄性激

3、素依賴型前列腺癌細(xì)胞內(nèi)，具有雄性激素受體的細(xì)胞株對Bax的促凋亡作用敏感，說明雄性激素受體具有增強(qiáng)Bax促細(xì)胞凋亡作用的功能。 2.用RNA干涉技術(shù)下調(diào)104R1細(xì)胞內(nèi)雄性激素受體蛋白表達(dá)量，可使細(xì)胞對Bax過表達(dá)的促凋亡作用顯著減低；用DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)使原來不表達(dá)雄性激素受體的PC3細(xì)胞表達(dá)雄性激素受體蛋白，可使其對Bax過表達(dá)的促凋亡作用的敏感性顯著增強(qiáng)。證實雄性激素受體在Bax介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中起到重要的作用。

4、 3.用細(xì)胞成份分餾技術(shù)結(jié)合免疫印跡技術(shù)檢測到：具有雄性激素受體的癌細(xì)胞在線粒體膜上的Bax蛋白量顯著高于無雄性激素受體的癌細(xì)胞，說明雄性激素受體具有促進(jìn)Bax蛋白從胞漿向線粒體膜轉(zhuǎn)移的功能，這可能是雄性激素受體增強(qiáng)Bax促凋亡作用的機(jī)制之一。 4.對各種非雄性激素依賴型前列腺癌細(xì)胞株施加紫外光UV，發(fā)現(xiàn)具有雄性激素受體的細(xì)胞株對UV誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡敏感，說明除Bax過表達(dá)外，雄性激素受體還參與UV誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，