冠心病患者血漿中血管過(guò)氧化物酶水平變化與血管炎癥反應(yīng)研究.pdf

1、研究目的：本實(shí)驗(yàn)旨在觀察冠心病患者血漿中血管過(guò)氧化物酶(VPO)的變化，在內(nèi)皮細(xì)胞中初步探討腫瘤壞死因子-α(TNF-α)誘導(dǎo)VPO參與血管炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制。 方法：本研究分為臨床研究和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，臨床研究共納入139名冠心病(CAD)患者及47名健康體檢者，所有研究對(duì)象分為三組，急性冠脈綜合征組(ACS)72名，穩(wěn)定型心絞痛組(SAP)67名和正常對(duì)照組(Control)47名。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)法檢測(cè)血漿中TN

2、F-α和髓過(guò)氧化物酶(MPO)水平；采用Western-Blot檢測(cè)血漿中VPO和MPO的表達(dá)。細(xì)胞研究：培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞，采用Western-Blot檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞的VPO表達(dá)，采用熒光法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS水平，采用ELISA法檢測(cè)細(xì)胞上清液中TNF-α水平。數(shù)據(jù)以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(-x±S.E.M.)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。兩組比較用t檢驗(yàn)，多組間比較采用ANOVA方差分析進(jìn)行檢驗(yàn)。雙側(cè)P<0.05判斷為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3、 結(jié)果： 1.ACS和SAP患者血漿中TNF-α、VPO水平明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01，P<0.01)，且ACS組顯著高于SAP組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；ACS組患者血漿中MPO水平顯著高于SAP組和正常對(duì)照組(P<0.01)，SAP組患者血漿中MPO水平高于正常對(duì)照組，但兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 2.ox-LDL呈時(shí)間和濃度依賴(lài)性地升高內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TNF-α水

4、平；ox-LDL(100 mg/L)呈時(shí)間依賴(lài)性地上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞VPO表達(dá)，升高細(xì)胞內(nèi)ROS水平。 3.ox-LDL(100 mg/L，24h)可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞VPO表達(dá)并升高細(xì)胞內(nèi)ROS水平，預(yù)先給予細(xì)胞內(nèi)抗氧化劑吡咯二硫代氨基甲酸乙酯(PDTC)(100μM)孵育細(xì)胞1h后，加入ox-LDL(100 mg/L)孵育細(xì)胞24h，可顯著抑制ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞VPO的表達(dá)及細(xì)胞內(nèi)ROS水平的增加，單獨(dú)給予PDTC(100μM)