桉樹開花相關(guān)基因在基因組圖譜上的定位.pdf

1、遺傳圖譜構(gòu)建是當前植物遺傳研究的熱點，但林木遺傳圖譜構(gòu)建中存在密度較低、共顯性標記不多、基于功能基因的標記缺乏等問題，如何開發(fā)共顯性的、基于功能基因的分子標記并用于林木遺傳圖譜構(gòu)建是急需解決的問題。桉樹在全球范圍內(nèi)是重要的造林樹種，也是林木遺傳研究的模式樹種，其遺傳圖譜構(gòu)建具有重要的理論意義和應(yīng)用價值。 利用下載的15條EST開花基因序列，進行了引物設(shè)計和PCR擴增條件優(yōu)化，有13對引物能成功進行PCR擴增。利用DGGE(Den

2、aturing gradinent electrophoresis)和33種限制性內(nèi)切酶對可成功PCR擴增的13個EST序列在尾葉桉×細葉桉F<,1>作圖譜系的多態(tài)性進行了篩選，分析了EST標記的分離方式，并將多態(tài)性的EST標記整合到尾葉桉和細葉桉的RAPD遺傳圖譜上。 分離方式研究中，有9個EST序列可用DGGE和合適的限制性內(nèi)切酶酶切并在作圖譜系中產(chǎn)生多態(tài)性，即產(chǎn)生EST標記，9個EST標記呈1:1的分離，包括1個偏離孟德爾

3、分離(a=0.05)，且均符合孟德爾分離。孟德爾正態(tài)分離的EST標記比例達88.9％，偏分離標記比例為11.1％。 在分離方式研究的基礎(chǔ)上進行了遺傳圖譜構(gòu)建的研究，運用作圖軟件Mapmaker3.0將EST標記整合到已構(gòu)建的RAPD遺傳圖譜上，結(jié)果表明：6個EST標記分別整合到尾葉桉的第3、8、10、13和15連鎖群上，總遺傳圖距1544cM，共23個連鎖群，標記間的平均距離為10.8cM。整合8個EST標記后的細葉桉新圖譜總遺