平頂山地區(qū)PRRSV分離株的三種結(jié)構(gòu)蛋白基因遺傳變異分析.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome， PRRS）是造成目前養(yǎng)豬業(yè)嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失的主要疾病之一。PRRS的臨床表現(xiàn)為母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、斷奶仔豬肺炎、生長遲緩且常常引起其他病原繼發(fā)感染。
　　國內(nèi)外相關(guān)研究表明：PRRSV不同分離株的核苷酸序列存在明顯差異。依據(jù)血清學(xué)實(shí)驗(yàn)和基因序列分析的結(jié)果，可將PRRSV分為兩種基因型，即美洲型（代表毒株為：ATCCVR-

2、2332）和歐洲型（代表毒株為：LV），兩者核苷酸序列同源性約為60％，其中ORF5的同源性僅為54%。研究表明：由PRRSV ORF5、ORF6、ORF7基因分別編碼的囊膜糖蛋白GP5（E）、膜蛋白GP6（M）、核衣殼蛋白GP7（N）是PRRSV的三種主要結(jié)構(gòu)蛋白，不同國家和地區(qū)的分離株的ORF5基因差異較大。
　　通過利用Marc-145細(xì)胞從平頂山不同地區(qū)發(fā)病豬場采集的病料中分離出7個(gè)毒株，參考Genbank發(fā)表的豬繁殖與呼

3、吸綜合征病毒（PRRSV）ATCC VR-2332的保守序列設(shè)計(jì)擴(kuò)增引物，擴(kuò)增PRRSV基因組中的ORF5、ORF6~7序列，并對所擴(kuò)增的序列進(jìn)行序列測定。測序結(jié)果通過DNAstar軟件進(jìn)行分析，和以往Genbank發(fā)布的PRRSV序列進(jìn)行比對和分析，本研究分離的7個(gè)平頂山株的ORF5與美洲型代表株VR-2332的核苷酸的序列的同源性為88.9%～90.2%；ORF6～7的為93.9%～94.8%；與歐洲型代表株LV的核苷酸的序列的同源

4、性為63.3%～64.2%；ORF6～7的為67.5%～68.1%，故本研究分離的7個(gè)平頂山株應(yīng)均屬于美洲型。
　　平頂山地區(qū)PRRSV ORF5基因序列之間同源性分別為為95.7%～100%；與HB-1、CH-1a、BJ-4、TW、VR-2332、LV等參考型毒株核苷酸序列同源性為96.4%～97.2%、95%～96%、88.1%～89.4%、89.1%～90.9%、88.9%～90.2%、63.3%～64.2%；同源性分析顯示