鼻咽癌組織脾酪氨酸激酶表達(dá)與其啟動子甲基化關(guān)系和臨床意義.pdf

1、鼻咽癌是華南地區(qū)常見的惡性腫瘤之一。鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展和遺傳因素、EBV感染、飲食因素等眾多因素相關(guān)，但是具體機(jī)制尚未完全清楚。 脾酪氨酸激酶（Spleen tyrosine kinase，SYK）在較長時間里被認(rèn)為是造血細(xì)胞特有的信號分子，后來發(fā)現(xiàn)SYK在多種非造血細(xì)胞中也有表達(dá)，并且在乳腺癌、肝癌、黑色素瘤、胃癌和頭頸部鱗狀細(xì)胞癌等腫瘤組織中表達(dá)異常，這些研究表明，SYK在不同腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中可能起著不同的作用；同時又有研

2、究證明，SYK啟動子甲基化可導(dǎo)致該基因失表達(dá)，SYK在EBV編碼的LMP2A（Latent membrane protein2A）誘導(dǎo)的細(xì)胞遷移作用中起重要作用。但是SYK在鼻咽癌組織中的表達(dá)情況卻還不清楚。 本文檢測了鼻咽癌組織中SYK的表達(dá)情況，分析了SYK表達(dá)水平和患者臨床病理特征以及預(yù)后的關(guān)系，研究了SYK啟動子甲基化情況與其表達(dá)的關(guān)系，并且探討了SYK與LMP2A之間的相互作用。 方法： 應(yīng)用免疫組織化

3、學(xué)方法，研究鼻咽癌組織中SYK蛋白表達(dá)水平和患者臨床病理特征以及預(yù)后的關(guān)系；應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)檢測鼻咽癌組織和鼻咽粘膜組織中SYK啟動子甲基化狀態(tài)，并分析啟動子甲基化狀態(tài)與SYK蛋白表達(dá)的關(guān)系；應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù)檢測SYK和LMP2A基因的mRNA水平；免疫熒光檢測SYK和LMP2A蛋白的表達(dá)以及共定位情況；應(yīng)用SPSS12．0分析軟件分析各個數(shù)據(jù)。 結(jié)果： 組織芯片免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：鼻咽癌組織中有8

4、5．52％（124/145）的組織表達(dá)SYK蛋白，同時39．31％（57/145）的組織高表達(dá)SYK；SYK在鼻咽癌組織中高表達(dá)與鼻咽癌患者的TNM分期、T分期及復(fù)發(fā)呈正相關(guān)（P<0．05）；與患者年齡、性別、轉(zhuǎn)移無關(guān)P>0．05）。 早期鼻咽癌患者SYK高表達(dá)表達(dá)組和低表達(dá)組患者的5年生存率分別34．29％和79．71％，兩組生存率有顯著差異（P<0．05）；晚期鼻咽癌患者SYK高表達(dá)表達(dá)組和低表達(dá)組患者的5年生存率分別36．

5、38％和57．79％，兩組生存率有顯著差異（P<0．05）；所有患者中，SYK高表達(dá)表達(dá)組和低表達(dá)組患者的5年生存率分別35．79％和63．50％，兩組生存率有顯著差異（P<0．05）。 單因素Cox回歸分析顯示SYK的蛋白高表達(dá)（P=0．005，HR=1．398）、患者性別（P=0．007，HR=0．409）、臨床分期（P=0．009，HR=1．572）、T分期（P=0．097，HR=1．523）、復(fù)發(fā)（P=0．024，HR=

6、1．728）、轉(zhuǎn)移（P=0．012，HR=2．124）與患者預(yù)后不良相關(guān)；多因素分析顯示SYK高表達(dá)（P=0．004，HR=1．432）、患者的性別（P=0．016，HR=0．444）、年齡（P=0．028，HR=1．027）、轉(zhuǎn)移（P=0．001，HR=3．028）分別是不良預(yù)后的獨立因素。 36例鼻咽癌組織中有77．78％（28/36）的檢測到了SYK啟動子的去甲基化，同時80．56％（29/36）檢測到了SYK蛋白表達(dá)，P

7、earson相關(guān)分析表明SYK蛋白表達(dá)同SYK啟動子的去甲基化呈顯著正相關(guān)（R=0．581，P<0．001）；14例鼻咽粘膜組織中有92．86％（13/14）的檢測到了SYK啟動子的甲基化，同時92．86％（13/14）的組織未檢測到SYK蛋白表達(dá)；所有的50例組織中58．00％（29/50）的檢查到了SYK啟動子的去甲基化，同時60．00％（30/50）的組織表達(dá)SYK蛋白，Pearson相關(guān)分析表明SYK蛋白表達(dá)同SYK啟動子的去甲

8、基化呈顯著正相關(guān)（R=0．711，P<0．001）。 熒光原位雜交顯示10例新鮮鼻咽癌組織中SYK mRNA和LMP2A mRNA表達(dá)水平均高于癌周圍組織以及5例鼻咽粘膜組織，且SYK mRNA和LMP2A mRNA的表達(dá)水平具有一致性；穩(wěn)定轉(zhuǎn)染LMP2A的SUNE1和CNE2細(xì)胞中SYK mRNA表達(dá)增強(qiáng)，同時SYK蛋白表達(dá)也有增強(qiáng)，并觀察到了兩個蛋白的共定位現(xiàn)象。 結(jié)論： 1．SYK在鼻咽癌組織中高表達(dá)并且與