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文檔簡介
1、我們擬應用攜帶-c-KIT突變的Kasumi-i細胞系體外研究伊馬替尼對白血病細胞生物學的影響,為伊馬替尼應用到c-KIT過表達或突變的AML患者提供臨床前實驗依據(jù).1.FLT3基因激活突變與急性白血病的關系及臨床意義PCR方法分別擴增FLT3基因第14、1 5外顯子(ITD所在區(qū)域)和第20外顯子(點突變所在區(qū)域).前者PCR產(chǎn)物在3%瓊脂糖凝膠電泳上,出現(xiàn)額外體積大于野生型FLT3的條帶即為ITD陽性產(chǎn)物;后者PCR產(chǎn)物經(jīng)EcoRV
2、內(nèi)切酶充分消化后,不能被切開的樣本即存在點突變.部分陽性樣本進行測序,分析其臨床相關性.2.酪氨酸激酶抑制劑伊馬替尼對Kasumi-1細胞增殖與凋亡的影響我們進一步應用MTT比色法觀察伊馬替尼對Kasumi-1細胞的生長抑制作用,流式細胞術(shù)分析細胞周期和檢測髓系分化抗原的表達,Annexin V標記、DNA凝膠電泳分析細胞凋亡.結(jié)果顯示,伊馬替尼抑制Kasumi-1細胞生長,使細胞阻滯于G0/G1期,誘導髓系分化抗原CD11b、CD13
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