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1、目的:本研究擬系統(tǒng)地檢測(cè)卵巢上皮性癌、卵巢交界性上皮性腫瘤、卵巢良性上皮性腫瘤等組織中WWOX基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島的甲基化狀態(tài),并分析WWOX基因的甲基化與卵巢上皮性癌的臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系。
方法:(1)以48例卵巢上皮性癌、18例卵巢交界性上皮性腫瘤、26例卵巢良性上皮性腫瘤及33例正常卵巢組織為研究對(duì)象,通過WWOX基因DNA提取、DNA甲基化修飾盒進(jìn)行DNA亞硫酸鹽修飾,采用甲基化特異性PCR(methylation
2、specific polymerase chain reaction,MSP)方法檢測(cè)以上不同卵巢組織中WWOX基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島的甲基化狀態(tài)。(2)分析WWOX基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島的甲基化發(fā)生率與卵巢上皮性癌患者年齡、手術(shù)病理分期、病理分級(jí)、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腹腔積液情況之間的關(guān)系。
結(jié)果:(1)卵巢上皮性癌、卵巢交界性上皮性腫瘤、卵巢良性上皮性腫瘤組織中WWOX基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島的甲基化率分別為43.75%、26.
3、32%、3.84%,正常卵巢組織中未檢測(cè)到WWOX基因CpG島甲基化。卵巢上皮性癌組織的CpG島甲基化率高于卵巢良性上皮性腫瘤和正常卵巢組織(P<0.008)。(2)48例卵巢上皮性癌組織中共有21例出現(xiàn)甲基化條帶,其中13例為完全甲基化(僅甲基化引物擴(kuò)增出目的條帶),8例為部分甲基化(甲基化引物和非甲基化引物均擴(kuò)增出目的條帶)。出現(xiàn)甲基化條帶的5例卵巢交界性上皮性腫瘤中有3例完全甲基化2例部分甲基化。1例發(fā)生甲基化的卵巢良性上皮性腫瘤
4、為完全甲基化。(3)晚期(Ⅲ期、Ⅳ期)卵巢上皮性癌的WWOX基因CpG島甲基化率高于早期(Ⅰ期、Ⅱ期)卵巢上皮性癌,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=4.148,P<0.05)。(4)卵巢上皮性癌WWOX基因的甲基化率在不同年齡、病理類型(漿液性上皮性癌、粘液性上皮性癌)、病理分級(jí)(G1、G2、G3)、有無腹水、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等方面的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:(1)卵巢上皮性癌組織中廣泛存在著WWOX基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島
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