中樞5-脂氧酶代謝物L(fēng)TB-,4-對哮喘的神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)作用.pdf

1、在該研究中,我們采用卵白蛋白致敏SD雄性大鼠,經(jīng)抗原反復(fù)攻擊制作大鼠的哮喘模型,對致敏大鼠進(jìn)行支氣管肺泡灌洗,支氣管肺泡灌洗液(BALF)進(jìn)行白細(xì)胞計數(shù),離心后的細(xì)胞沉淀進(jìn)行細(xì)胞分類計數(shù).結(jié)果發(fā)現(xiàn)致敏大鼠BALF內(nèi)白細(xì)胞數(shù)明顯增多,細(xì)胞分類計數(shù)發(fā)現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞比例比正常對照大鼠顯著增加(P<0.05).肺組織切片發(fā)現(xiàn)氣道粘膜下和血管周圍有明顯的炎癥細(xì)胞浸潤,其組織學(xué)評分顯著高于正常對照的大鼠(P<0.05).用反向高效液相法

2、(RP-HPLC)測定致敏大鼠肺和腦組織的LTs含量變化,發(fā)現(xiàn)致敏大鼠腦內(nèi)LTB4的水平和肺組織內(nèi)的同步升高,與正常對照相比有顯著差異(P<0.05),LTC4的含量僅在肺組織內(nèi)升高,腦組織內(nèi)與正常對照相比沒有顯著差異(P>0.05).應(yīng)用半定量RT-PCR法檢測5-LO途徑各種酶的mRNA表達(dá)變化,結(jié)果發(fā)現(xiàn)致敏大鼠的肺和腦組織的5-LO和LTA4-H mRNA的表達(dá)較正常大鼠顯著上升(P<0.05),LTC4-S mRNA的表達(dá)僅在肺

3、組織內(nèi)升高,RT-PCR的結(jié)果與RP-HPLC的檢測結(jié)果相同,提示哮喘狀況下肺和腦組織LTs的變化發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平.應(yīng)用免疫印跡法對哮喘狀況下肺和腦組織5-LO的蛋白質(zhì)表達(dá)進(jìn)行檢測,其水平也是較正常大鼠顯著升高(P<0.05),補充了RT-PCR法對5-LO mRNA表達(dá)的檢測結(jié)果.用免疫組織化學(xué)方法對5-LO的蛋白質(zhì)表達(dá)定位進(jìn)行研究,5-LO在肺組織的表達(dá)以浸潤的肥大細(xì)胞,嗜酸性粒細(xì)胞為主,肺泡上皮細(xì)胞也有表達(dá).以上的研究結(jié)果提示,腦內(nèi)