細(xì)菌裂解物的免疫調(diào)節(jié)作用.pdf

1、該文在國(guó)外研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化制備雙歧雙歧桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌的細(xì)菌裂解物,研究它們各自的以及復(fù)合后的體內(nèi)外免疫調(diào)節(jié)作用.該文采用化學(xué)酶解法制備雙歧雙歧桿菌完整肽聚糖(Bb<,WPG>),采用超聲破碎法制備雙歧桿菌裂解物(Bb<,BL>)、肺炎鏈球菌裂解物(Sp<,BL>)、流感嗜血桿菌裂解物(Hi<,BL>),采用酶解法制備金黃色葡萄球菌裂解物(Sa<,BL>).淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)結(jié)果表明Bb<,WPG>、Bb

2、<,BL>、Sa<,BL>、Bb<,WPG>+Sa<,BL>、Bb<,BL>+Sa<,BL>、Bb<,WPG>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>、Bb<,BL>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>刺激細(xì)胞免疫功能.結(jié)果顯示,Bb<,WPG>濃度從0.07g/L增至2.25g/L均未見有明顯的淋巴細(xì)胞增殖;Bb<,BL>濃度達(dá)到0.71g/L就可明顯刺激T淋巴細(xì)胞增殖;Sa<,BL>的濃度為0.012g/L可以明

3、顯刺激淋巴細(xì)胞產(chǎn)生增殖作用,而且隨著濃度的升高,刺激作用不斷增強(qiáng),濃度達(dá)到0.195g/L時(shí)刺激作用最強(qiáng);40％Bb<,WPG>+60％Sa<,BL>組合濃度從0.008g/L到0.5g/L都可明顯刺激淋巴細(xì)胞的增殖作用,其他組合可產(chǎn)生明顯的抑制T淋巴細(xì)胞增殖作用;60％Bb<,BL>+40％Sa<,BL>組合濃度從0.019g/L到1.250g/L都能明顯刺激T淋巴細(xì)胞增殖,70％Bb<,BL>+30％Sa<,BL>組合濃度從0.15

4、6g/L到1.250g/L也都能明顯刺激T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生增殖作用,其他組合不能刺激T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生增殖作用;濃度為0.045g/L到1.45g/L Bb<,BL>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>復(fù)合物95％(40/42)試驗(yàn)組可產(chǎn)生明顯刺激T淋巴細(xì)胞增殖作用,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01);濃度為0.045g/L到1.45g/L Bb<,WPG>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>復(fù)合物有36％(13/36)的試

5、驗(yàn)組可產(chǎn)生明顯刺激T淋巴細(xì)胞增殖作用,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05).溶血空斑試驗(yàn)檢測(cè)Bb<,WPG>、Bb<,BL>、Sa<,BL>、Bb<,BL>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>、Bb<,WPG>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體形成細(xì)胞的能力.0.28g/L的Bb<,WPG>和0.70g/L的Bb<,BL>均能明顯刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生抗體形成細(xì)胞,通過標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)算Bb<,WPG>刺激小鼠產(chǎn)生

6、抗體形成細(xì)胞的能力優(yōu)于Bb<,BL>;0.1g/L的Sa<,BL>可明顯刺激小鼠產(chǎn)生抗體形成細(xì)胞;1.45g/L的Bb<,BL>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>復(fù)合物(Bb<,BL>:Sa<,BL>:Sp<,BL>:Hi<,BL>=6.25:6.25:1:1,克/克)就可明顯刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生抗體生成細(xì)胞;1.45g/L的Bb<,WPG>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>復(fù)合物(Bb<,WPG>:Sa<,BL

7、>:Sp<,BL>:Hi<,BL>=8.33:12.5:2.33:1,克/克)可明顯刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生抗體生成細(xì)胞.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明Bb<,WPG>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>復(fù)合物和Bb<,BL>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>復(fù)合物對(duì)小鼠的細(xì)菌感染具有保護(hù)作用.小鼠經(jīng)0.2mL濃度為1.45g/L的Bb<,WPG>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>復(fù)合物兩次免疫后,大腸埃希菌感染小鼠存活率

8、為60％,金黃色葡萄球菌感染小鼠存活率為91.7％(p<0.05或p<0.01,均與對(duì)照組比較);小鼠經(jīng)0.2mL濃度為1.45g/L的Bb<,BL>+Sa<,BL>+Sp<,BL>+Hi<,BL>復(fù)合物兩次免疫后,大腸埃希菌感染小鼠存活率為70％,金黃色葡萄球菌感染小鼠存活率為72.7％(p<0.01,均與對(duì)照組比較).小鼠經(jīng)上述兩種復(fù)合物免疫后在細(xì)菌攻擊前未見有明顯的不良反應(yīng).我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí),最佳組合的細(xì)菌裂解物復(fù)合物有較好的免