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文檔簡介
1、本文以工業(yè)化生產為目的,研究了用Fmoc固相法人工合成丙型肝炎疫苗多肽(以下簡稱疫苗多肽)的生產工藝,比較了Wang樹脂和二氯三苯甲基樹脂(以下簡稱二氯樹脂)在固相合成中的的優(yōu)勢和劣勢,以及粗產物肽和目標肽的產率和純度;創(chuàng)造性的引入N<'α>-Dmb基團,提高了困難氨基酸Val的連接率;優(yōu)化了脫保護的策略以及切割試劑的選擇;通過質譜鑒定分析所得目標多肽的分子量,用RP-HPLC進行粗肽的分析和純化,系統(tǒng)完整的建立了整套合成純化工藝路線及
2、相關的工藝參數,為后續(xù)的工業(yè)化生產奠定了堅實的基礎。采用該合成純化工藝路線,以二氯樹脂為載體,合成的粗肽產率達到了90.76%,純化后的目標肽產率為63.02%純度達到了98.5%,并實現了18克每批的合成量。二氯樹脂以其高效率、低成本、產品的高純度完全符合工業(yè)化生產疫苗多肽的各項經濟技術指標。 1.文獻綜述部分,簡述了丙型肝炎疫苗的研究現狀,詳細介紹了多肽固相合成技術中的合成方法、分離純化與鑒定技術,最后概述了多肽類藥物的應用
3、情況與研究展望。 2.采用Fmoc固相法人工合成了疫苗多肽,比較了兩種樹脂在合成過程中的異同點,對合成過程中的幾個重要步驟和難點進行了優(yōu)化和改進,如針對困難氨基酸Val的連接,設計了引入N<'α>-Dmb基團的獨特合成策略,提高了連接率及切割效率,確定了合成工藝中相關的各項工藝技術參數。最后用二氯樹脂做為載體進行了18克每批的疫苗多肽合成。 3.用RP-HPLC進行粗肽的分析和純化,根據疫苗多肽的理化性質采用乙腈-水的流
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