TSA和PS-341對耐紫杉醇卵巢癌細胞的聯(lián)合作用研究.pdf

1、【研究背景及目的】卵巢癌是女性生殖器三大惡性腫瘤之一,雖然對卵巢癌的治療手段在提高,但其在女性生殖器惡性腫瘤中致病死率仍占第一位。晚期卵巢癌較佳的治療方案是腫瘤細胞減滅術(shù)聯(lián)合化療,化療在晚期卵巢癌的治療中起著非常重要的作用,目前臨床標準化療方案仍是紫杉醇與順鉑聯(lián)合化療方案(TP)。術(shù)后至少有70％的患者使對TP方案化療有反應(yīng),但有研究顯示這種聯(lián)合化療的最初療效卻不夠持久而且腫瘤細胞也可獲得耐藥性。本研究旨在探討已獲得FDA認證的蛋白酶體

2、抑制劑PS-341和組蛋白脫乙?；敢种苿㏕SA對TP治療方案中對Taxol耐藥的卵巢癌細胞的作用及其作用機制。
　　【研究方法】人卵巢癌細胞系A(chǔ)2780(紫杉醇敏感株)及其變異株A2780T(紫杉醇耐藥株)經(jīng)Taxol、TSA+PS-341不同時間、不同濃度處理后：
　?、偈褂肕TT分析法檢測A2780細胞和A2780T細胞的存活率情況差異,并確定后續(xù)研究藥物使用濃度。
　?、谑褂昧魇郊毎麅x檢測A2780細胞和A27

3、80T細胞周期分布情況和細胞凋亡差異。
　?、凼褂肳estern Blotting檢測細胞周期相關(guān)蛋白的表達變化。
　?、苤|(zhì)體包裹cyclinB1 siRNA轉(zhuǎn)染耐泰素卵巢癌細胞A2780T,以轉(zhuǎn)染對照siRNA作為對照。
　　⑤流式細胞儀分析A2780T細胞轉(zhuǎn)染后經(jīng)Taxol或TSA+PS-341處理后細胞周期及細胞凋亡情況變化;龍膽紫染色法檢測轉(zhuǎn)染后A2780T細胞的存活率情況差異。
　　【研究結(jié)果】

4、>　?、費TT結(jié)果確定Taxol的使用濃度為1umol/L,TSA+PS-341的使用濃度為500nmol/L+40nmol/L。
　?、贏2780細胞和A2780T細胞經(jīng)TSA+PS-341處理后均有明顯的細胞周期G2/M期阻滯及凋亡發(fā)生,A2780T細胞經(jīng)Taxol處理卻周期阻滯及細胞凋亡發(fā)生不明顯。
　?、踳estern blot檢測細胞周期蛋白發(fā)現(xiàn)cyclinB1在A2780T中表達水平較高。
　?、芨蓴_cyc