CML患者胸腺近期輸出功能和TCR Vβ譜系利用特點(diǎn).pdf

1、　　目的：了解CML患者胸腺近期輸出功能(TRECs的含量)以及TCR Vβ亞家族T細(xì)胞的基因表達(dá)和克隆性增殖情況,從而為臨床特異性免疫治療研究提供資料。
　　方法：收集38例CML患者的42份外周血標(biāo)本,分離PBMCs,并采用MACS方法分選部分患者的CD4~+和CD8~+細(xì)胞,提取RNA和DNA后,通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR(real-time PCR)檢測(cè)各細(xì)胞中TRECs的含量,利用免疫熒光檢測(cè)的PBMCs中CD3~+細(xì)胞的陽(yáng)性率

2、,計(jì)算CD3~+細(xì)胞中TRECs含量,同時(shí)還采用RT-PCR和基因掃描方法分析CML患者PBMCs、CD4~+和CD8~+細(xì)胞中TCR Vβ24個(gè)亞家族T細(xì)胞的基因表達(dá)和克隆性。14例正常人外周血作對(duì)照。
　　結(jié)果：CML-CP患者PBMCs、CD3~+、CD4~+和CD8~+細(xì)胞中TRECs含量均明顯低于正常人,而緩解期和allo-BMT 6個(gè)月后的患者CD3~+細(xì)胞中TRECs含量比發(fā)病期有所升高,比正常人稍低,但差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)

3、學(xué)意義。不同性別的正常人和CML-CP患者外周血TRECs含量也有差別,正常人CD8~+細(xì)胞和CML-CP患者CD4~+細(xì)胞中TRECs含量,女性均明顯高于男性,而在其它各組,盡管女性TRECs含量也比男性高,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　全部CML患者均存在不同程度的Vβ亞家族缺失,平均僅表達(dá)5.52個(gè)(PBMCs)、11.58個(gè)(CD4~+)和12.37個(gè)(CD8~+)Vβ亞家族,三者均以Vβ13的表達(dá)率最高?；熀笤缙?TCR

4、Vβ亞家族的表達(dá)明顯減少,達(dá)完全緩解時(shí),Vβ亞家族的表達(dá)逐漸恢復(fù)。基因掃描分析發(fā)現(xiàn)：PBMCs、CD4~+和CD8~+細(xì)胞分別有70.4%(19/27例)、73.7%(14/19例)和89.5%(17/19例)的患者部分Vβ亞家族出現(xiàn)克隆性增殖T細(xì)胞,PBMCs和CD4~+細(xì)胞中,克隆性增殖的T細(xì)胞分布于16和14個(gè)Vβ亞家族,均以Vp21克隆性增殖最常見(jiàn),而CD8~+細(xì)胞中,克隆性增殖的T細(xì)胞分布于20個(gè)Vβ亞家族,以Vβ11的克隆性