抗TCR抗體誘導(dǎo)正常和NOD小鼠胸腺細(xì)胞陰性選擇.pdf

1、該文根據(jù)抗TCR單克隆抗體對正常BALB/C及自身免疫性糖尿病模型NOD小鼠胸腺細(xì)胞陰性選擇的誘導(dǎo)研究,得出以下結(jié)論.1.抗TCR抗體、PMA、Con A誘導(dǎo)胸腺及外周T細(xì)胞的活化分裂,我們用CFSE標(biāo)記細(xì)胞、流式細(xì)胞儀分析法檢測,證明此法不僅可以測定單細(xì)胞水平上細(xì)胞的分裂,還可根據(jù)熒光強(qiáng)度判斷細(xì)胞的分裂次數(shù).2.正常BALB/C小鼠胸腺不同亞群T細(xì)胞對抗TCR抗體誘導(dǎo)敏感性有差異,CD3<'->CD4<'->(三陰TN)、CD8<'+

2、>CD3V<'->、CD3<'+>CD4<'+>CD8<'->(單陽SP)、CD3<'+>CD4<'->CD8<'+> SP細(xì)胞出現(xiàn)不同變化,TN細(xì)胞相對耐受凋亡,而CD8<'+>CD3<'->、DP細(xì)胞對凋亡誘導(dǎo)敏感.3.胸腺和脾臟表面CD3、CD4、CD8的表達(dá)與性別無明顯關(guān)系,6-9周小鼠脾臟CD<'+>細(xì)胞明顯多于3-4周小鼠;胸腺細(xì)胞的增殖與年齡、性別無關(guān),而3周雌性小脾細(xì)胞對PMA+IONO刺激事的增殖應(yīng)答比雄性明顯,4-6

3、周雄小鼠脾細(xì)胞的增殖能力強(qiáng)于雄性小鼠,7-8周雌性小鼠脾細(xì)胞對抗TCR抗體的應(yīng)答能力明顯減小.表明免疫系統(tǒng)的雌雄異型可能早于青春期.4.雌、雄不同性別BALB/C小鼠對相同TCR受體誘導(dǎo)凋亡的敏感性有差異,雄性小鼠胸腺細(xì)胞的凋亡明顯于雌性.且隨著大量皮質(zhì)區(qū)CD4<'+>CD8<'+>胸腺細(xì)胞的凋亡,CD4<'->CD8<'->細(xì)胞、成熟的髓質(zhì)CD4<'+>CD8<'+>細(xì)胞水平無明顯改變.5.anti-CD28 mAb誘導(dǎo)胸腺細(xì)胞的凋亡

4、.胸腺T細(xì)胞對anti-CD28 mAb或anti-CD28 mAb+CD28 mAb刺激的不同應(yīng)答與細(xì)胞的成熟階段密切相關(guān).胸腺皮、髓質(zhì)中的胸腺細(xì)胞亞群發(fā)生凋亡時,經(jīng)CD28傳導(dǎo)的胞內(nèi)途徑均受到影響.6.抗TCR抗體處置后,小鼠成熟髓質(zhì)區(qū)高表達(dá)T細(xì)胞受體的單陽性細(xì)胞數(shù)目成倍增加,皮質(zhì)區(qū)低表達(dá)T細(xì)胞受體的不成熟雙陽性細(xì)胞數(shù)目減少.成熟的單陽性胸腺細(xì)胞高表達(dá)歸巢受體L-selectin,表型分析(TCRαβ、CD69、HSA、Vβ7-in

5、tegrin、Qa-2)顯示增加的這群細(xì)胞為胸腺的新遷出細(xì)胞,同時小鼠外周淋巴結(jié)及脾臟CD4<'+>、CD8<'+>新遷出細(xì)胞數(shù)量減少,表明抗TCR抗體能抑制胸腺T細(xì)胞向外周遷移.7.與BALB/c小鼠胸腺細(xì)胞結(jié)果相比較:抗TCR抗體誘導(dǎo)的增殖應(yīng)答較弱,此種缺乏與年齡及NOD胸腺CD4<'+>CD8<'->和CD4<'->CD8<'+>SP細(xì)胞有關(guān).8.與BALB/c小鼠胸腺細(xì)胞結(jié)果相比較:1)雙信號刺激對NOD和BALB/c CD4<

6、'+>CD8<'+>亞群的明顯促凋亡作用相似;而NOD小鼠髓質(zhì)6C10<'+>HSA<'hi>CD4<'+>CD8<'->SP細(xì)胞對anti-TCRmAb+CD28mAb介導(dǎo)凋亡的敏感性明顯弱于BALB/c小鼠.2)體內(nèi)抗TCR抗體處置后,NOD髓質(zhì)6C10<'+>HSA<'hi>CD4SP不成熟單陽細(xì)胞的凋亡耐受明顯.表明NOD小鼠胸腺髓質(zhì)不成熟單陽性細(xì)胞亞群的陰性選擇缺乏,反映了NOD小鼠疾病的發(fā)作可能不僅與外周耐受有關(guān)、同時與胸腺