ATP、膜分離技術、聚酰胺樹脂分離純化蘆薈多糖.pdf

1、針對現(xiàn)有蘆薈多糖生產工藝存在能耗高、有機溶劑污染嚴重、多糖生物活性低等缺點，建立了一條新的蘆薈多糖生產工藝路線和分離純化方法，并分析了純化所得蘆薈多糖單糖組成成分。 首先，利用溶液聚合法制備了丙烯腈、丙烯酰胺和苯乙烯三元共聚物，紅外光譜分析表明丙烯腈、丙烯酰胺、苯乙烯三種單體發(fā)生了三元共聚；通過TG，DSC熱分析手段確定了共聚物中氰基與酰胺基的環(huán)化機理為離子環(huán)化機理，苯乙烯單體的加入減少了環(huán)化反應的發(fā)生，使得失重率增加，同時保留

2、了更多的酰胺功能基團，TG熱分解溫度也說明共聚物材料具有很好的熱穩(wěn)定性，適合制備超濾膜分離材料。 其次，采用相轉移法制備了丙烯腈/丙烯酰胺/苯乙烯三元共聚物超濾膜，采用SEM等手段對膜的結構和性能進行了表征。膜表面和斷面結構SEM觀察結果表明制備所得膜為不對稱有機高分子膜，具有典型超濾膜結構特征；考查了膜滲透通量、截留分子量、蛋白質吸附量、含水率、空隙率、耐酸性等膜性能參數(shù)，結果顯示膜具有蛋白質吸附量少(0.0210 mg/cm

3、<'2>)，含水率(74.37﹪)和孔隙率高(68.24﹪)的特點；膜滲透通量為26．33mL/(cm<'2>·h)，截留分子量為68000，且具有強耐酸性，具有膜滲透通量大、截留率高等特點，具有廣闊應用前景。 第三，采用自制超濾膜和超濾裝置對蘆薈多糖水溶液進行超濾實．驗，實現(xiàn)了蘆薈多糖的分級純化。滲透過程中膜透過液中蘆薈多糖隨著超濾時間增加而減少，并且開始階段下降速率很快，這說明在膜截留分子量之外即分子量小于68000的蘆薈多

4、糖透過了膜，使得在濃縮液中分子量小于68000的蘆薈多糖的含量越來越少，從而實現(xiàn)了蘆薈多糖的分級純化，超濾實驗工作壓力為0.1MPa-0.2MPa,溶液pH為3-4，基本確定了蘆薈多糖膜分離純化工藝。 第四，采用雙水相技術提取分離蘆薈多糖，研究了(NH<,4>)<,2.SO<,4>對不同分子量PEG的分相能力，考查發(fā)現(xiàn)(NH<,4>)<,2>SO<,4>對PEG6000、PEG-10000均具有良好的分相能力，綜合考慮后選定PE

5、G6000/(NH<,4>)<,2>SO<,4>體系作為分離純化體系；并在此體系下考查了pH值、NaCl和銅鹽含量對蘆薈多糖和蛋白質回收率的影響，結果表明：pH值對蛋白質回收率影響不大，當pH值為1時，蘆薈多糖的回收率達到最大；NaCl和銅鹽添加劑的加入改變了體系中蛋白質回收率的分配情況，對蛋白質回收率的影響很大，當加入NaCl量為10.5g或銅鹽量(A物質)為80mg時，能夠實現(xiàn)多糖和蛋白質的分離純化，NaCl的加入加速了兩相分離的速

6、度，從而為蘆薈多糖中蛋白質的去除提供了一條新的途徑；所得多糖進行紫外和紅外分析發(fā)現(xiàn)，紅外光譜圖具有典型蘆薈多糖特征吸收，并且多糖水溶液在190-600nm范圍內掃描所得紫外可見光光譜圖顯示在400nm以后也有較強的吸收，而且在200-210nm之間有多糖特有的末端吸收，在280nm蛋白質特征吸收處沒有吸收峰。最后采用聚酰胺樹脂柱，去離子水、0.2mol/LNaCl、5﹪NaH為洗脫劑梯度洗脫，得到三種多糖：重點分析了水洗所得蘆薈多糖。水

7、洗脫所得蘆薈多糖在氮氣氛圍下0-400℃范圍內的TG曲線顯示多糖只有一個失重區(qū)間，說明水洗脫蘆薈多糖是一個分子量分布比較均勻的蘆薈多糖，紅外光譜分析表明水洗脫所得多糖可能為部分乙酰化的酸性多糖，5﹪NaOH溶液洗脫所得多糖可能為以甘露糖為主的酸性多糖；水洗脫和5﹪NaOH洗脫所得多糖用硫酸．苯酚法顯色后在600-190nm范圍內紫外掃描圖表明，兩種多糖具有相似的吸收峰，都具有兩個較大的特征吸收，吸收波長相差不大，并且在490nm左右都存