菊花降血壓有效部位的篩選及相關(guān)實驗研究.pdf

1、高血壓是一種發(fā)病率、致殘率、死亡率較高的疾病。目前的降血壓的化學(xué)合成藥物大都存在作用時間短、毒副作用大、依賴性較強,治療效果存在局限性等問題。我國醫(yī)學(xué)典籍中關(guān)于中藥降血壓的記載頗多,中藥資源豐富,價格低廉,且其毒副作用小。
　　 現(xiàn)在藥理學(xué)研究表明,菊花提取物(Chrysanthemummorifoliumextract,CME)具有治療心血管系統(tǒng)疾病的作用。對菊花進(jìn)行初步的研究,篩選降血壓的有效部位,開發(fā)降血壓新藥。有非常重要

2、的現(xiàn)實意義。
　　 本研究的主要內(nèi)容有:(1)采用血管緊張素轉(zhuǎn)化酶-底物-血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACE-HHL-ACEI)反應(yīng)體系,以高效液相色譜法測定反應(yīng)體系中馬尿酸含量,衡量ACE抑制劑的活性,追蹤菊花降血壓有效部位；(2)比較菊花的水、50％乙醇和95％乙醇提取物對ACE抑制作用的活性；(3)采用石油醚、乙酸乙酯和丙酮有機溶劑初步萃取分離菊花95％乙醇提取物,并研究丙酮萃取的丙酮用量、不同時間和不同溫度所得的萃取物對AC

3、E抑制作用的影響；(4)采用硅膠柱層析和半制備高效液相色譜進(jìn)行進(jìn)一步分離提純菊花中丙酮萃取物；(5)將有效部位的成分的定性檢測和降高血壓的動物實驗研究。
　　 通過以上實驗,得到以下研究結(jié)果:
　　 (1)高效液相色譜法測定ACE-HHL-ACEI反應(yīng)體系中馬尿酸含量,馬尿酸的峰面積與濃度的線性關(guān)系的相關(guān)系數(shù)r=0.9996,馬尿酸的加樣回收率為97.889％～105.061％,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.53％,精密度

4、的相對偏差(RSD)為1.97％。
　　 (2)菊花95％乙醇提取物的IC50為70.52±2.04mg/mL,比50％乙醇提取和水提物對ACE抑制作用的活力強(P<0.05)。
　　 (3)通過石油醚、乙酸乙酯和丙酮有機溶劑對菊花95％乙醇提取物初步萃取分離,得到丙酮萃取物的IC50為14.47±1.26mg/mL。比95％乙醇提取物對ACE抑制作用的活性明顯增強(P<0.01)。
　　 (4)通過硅膠柱層析的

5、方法對丙酮萃取物進(jìn)行再次分離,得到對ACE抑制作用最強的甲醇洗脫部位(組分5),該部位的IC50為0.71±0.05mg/mL,對ACE抑制作用的活性進(jìn)一步增強(與丙酮萃取物比較,P<0.01),然而半制備高效液相分離該部位,獲得的18個化合物對ACE抑制作用的活性沒有繼續(xù)增強。說明菊花降血壓的有效部位是甲醇洗脫部位(組分5)。
　　 (5)通過對甲醇洗脫部位化學(xué)成分的定性檢測,可知有效部位為黃酮類化合物。體內(nèi)實驗結(jié)果表明低劑量