大蒜素對(duì)寒凝血瘀心肌缺血?dú)怏w信號(hào)分子調(diào)控及微循環(huán)影響的研究.pdf

1、背景：冠心病心絞痛、急性心肌梗死(AMI)是臨床最常見的心肌缺血性疾病，均屬于中醫(yī)血瘀證范疇。寒凝血瘀是缺血性心臟病臨床常見的中醫(yī)證型，前期臨床研究表明，大蒜素能夠作用于冠心病心絞痛的多個(gè)發(fā)病環(huán)節(jié)，具有中藥多靶點(diǎn)起效的特性，對(duì)缺血心肌有良好的保護(hù)作用，尤其對(duì)寒證的治療作用明顯優(yōu)于熱證。大蒜素對(duì)寒凝血瘀證的治療作用與歷代文獻(xiàn)記載的大蒜具有溫通活血作用頗為一致，提示大蒜素也可能具有溫通活血的作用，發(fā)揮對(duì)寒凝血瘀心肌缺血的治療作用。

2、目的：探討大蒜素對(duì)寒凝血瘀心肌缺血的作用機(jī)制，從大蒜素對(duì)氣體信號(hào)分子調(diào)控和對(duì)微循環(huán)的改善，揭示大蒜素溫通活血治療寒凝血瘀心肌缺血的病理生理及藥理機(jī)制，并對(duì)血瘀證和寒凝血瘀心肌缺血患者的微循環(huán)進(jìn)行觀測(cè)。 方法：本研究分為理論探討、實(shí)驗(yàn)研究和臨床研究三大部分。 (1)理論探討：圍繞研究目的，從寒凝血瘀心肌缺血的證治研究、氣體信號(hào)分子與活血化瘀研究、冠脈微循環(huán)障礙的中西醫(yī)結(jié)合研究三方面進(jìn)行了理論探討。 (2)實(shí)驗(yàn)研究：

3、 ①首先采用間斷反復(fù)冷應(yīng)激和垂體后葉素(Pit)聯(lián)合造模的方法，建立了大鼠寒凝血瘀心肌缺血病證結(jié)合模型：將大鼠分別裝入籠內(nèi)，置于-5℃±1℃環(huán)境中，連續(xù)3h，使大鼠全身暴露于低溫環(huán)境。然后將大鼠取出，恢復(fù)20℃±1℃室溫，并給予Pit20U/kg/d腹腔注射，連續(xù)3天。造模第3天，大鼠寒凝血瘀心肌缺血模型造模成功。同時(shí)，從大鼠外觀狀況、體溫、舌耳微循環(huán)血氧飽和度(StO<,2>)、心電圖、血液生化指標(biāo)、心肌病理、染色等方面對(duì)模型

4、進(jìn)行了綜合評(píng)價(jià)。 ②在大鼠寒凝血瘀心肌缺血?jiǎng)游锬Ｐ偷幕A(chǔ)上，觀察了大蒜素對(duì)寒凝血瘀心肌缺血的一般生理指標(biāo)(證候、體溫、心電圖)、生化指標(biāo)(FT<,3>、FT<,4>、TSH、cTnT、MDA、SOD)、血管舒縮活性肽(CGRP、ET)、心肌病理的作用。 ③從大蒜素對(duì)氣體信號(hào)分子NO、NOS、H<,2>S和對(duì)心肌eNOS、ET-1mRNA表達(dá)的影響，研究了大蒜素對(duì)寒凝血瘀心肌缺血的氣體信號(hào)分子調(diào)控機(jī)制。 ④從可視光

5、微循環(huán)StO<,2>、微血管內(nèi)皮細(xì)胞Caveolin-1、CD34、心肌毛細(xì)血管超微結(jié)構(gòu)，研究了大蒜素對(duì)寒凝血瘀心肌缺血微循環(huán)的影響。 (3)臨床研究： ①通過對(duì)健康成人篩查，取得舌、面部可視光StO<,2>正常值，并測(cè)定血瘀證患者活血化瘀治療前后的舌、面部可視光StO<,2>，對(duì)血瘀證的微循環(huán)功能進(jìn)行了臨床研究。 ②通過對(duì)急診PCI及溶栓治療后的急性期AMI患者進(jìn)行超聲心動(dòng)圖和MCE檢查，評(píng)價(jià)心肌微循環(huán)，觀測(cè)寒

6、凝血瘀心肌缺血的心肌微循環(huán)特點(diǎn)。 結(jié)果： (1)大鼠外觀狀況觀察評(píng)價(jià)，符合中醫(yī)寒凝血瘀證候表現(xiàn)：耳溫和肛溫降低分別反映了寒冷因素對(duì)外周和內(nèi)部體溫的影響；耳、舌StO<,2>降低表明外周微循環(huán)的功能減退；心電圖J點(diǎn)的變化可判斷心肌缺血模型的成立；心臟StO<,2>降低表明心肌微循環(huán)功能受損；心率的減慢、血清FT<,3>、FT<,4>、TSH的降低反映了寒的征象；血漿ET的增高反映了血管痙攣、血瘀的情況；心肌組織病理切片、染

7、色證實(shí)了模型心肌缺血、壞死的存在。應(yīng)用具有熱性藥屬性的抗心肌缺血藥硝酸甘油治療進(jìn)行反證，顯著改善了各項(xiàng)指標(biāo)，驗(yàn)證了模型的寒凝血瘀心肌缺血診斷。綜合上述各項(xiàng)指標(biāo)，可以確定采用間斷反復(fù)冷應(yīng)激和Pit聯(lián)合造模的方法建立的大鼠寒凝血瘀心肌缺血病證結(jié)合模型成立，符合中醫(yī)理論。 (2)大蒜素對(duì)寒凝血瘀心肌缺血的一般指標(biāo)、生化指標(biāo)、血管舒縮活性肽調(diào)節(jié)、心肌病理均有改善作用：低劑量大蒜素可明顯減少寒凝血瘀心肌缺血大鼠心肌中MDA含量，增加SOD

8、活力。 (3)在對(duì)氣體信號(hào)分子調(diào)控機(jī)制方面，大蒜素低劑量明顯能上調(diào)eNOSmRNA表達(dá)，促進(jìn)eNOS的合成，顯著提高大鼠心肌組織NOS、NO含量；中劑量能顯著提高血漿H,S含量，降低心肌組織H2S合酶含量。 (4)在微循環(huán)方面，大蒜素中、低劑量能顯著提高寒凝血瘀心肌缺血大鼠的耳、舌、心臟StO<,2>，大蒜素中劑量能顯著降低Caveolin-1的表達(dá)，增加CD34的表達(dá)，減輕心肌超微結(jié)構(gòu)病變程度，有改善微循環(huán)的作用。

9、 (5)臨床研究表明，可視光StO<,2>面部最低，口唇最高；舌各部位的StO<,2>值以舌面最高，活血化瘀治療后各部位StO<,2>明顯增高。 (6)超聲心動(dòng)檢查寒凝血瘀證患者對(duì)負(fù)荷試驗(yàn)的反映更明顯，MCE心尖K值顯著低于非寒凝血瘀證。 結(jié)論： (1)間斷反復(fù)冷應(yīng)激和Pit聯(lián)合造模的方法建立的大鼠寒凝血瘀心肌缺血模型符合中醫(yī)證候特點(diǎn)。 (2)大蒜素具有多重作用機(jī)制，能針對(duì)寒凝血瘀心肌缺血的多個(gè)發(fā)病環(huán)

10、節(jié)，通過調(diào)控氣體信號(hào)分子和改善微循環(huán)，多層面發(fā)揮對(duì)缺血心肌的保護(hù)作用，以中、低劑量作用最佳。 ①大蒜素能提高心肌組織抗氧化能力，保護(hù)缺血心肌：通過調(diào)控血管活性肽CGRP、ET的作用，拮抗由于造模因素所致的冠脈痙攣收縮，舒張血管，改善心電圖J點(diǎn)變化，降低aTnT，減輕心肌缺血損傷。 ②大蒜素對(duì)寒凝血瘀心肌缺血的氣體信號(hào)分子調(diào)控機(jī)制是：通過上調(diào)eNOSmRNA表達(dá)，下調(diào)ET-1mRNA表達(dá)，升高NOS，促進(jìn)NO的釋放，同時(shí)下

11、調(diào)H<,2>S，多方面發(fā)揮對(duì)缺血心肌的保護(hù)作用。 ③大蒜素對(duì)寒凝血瘀心肌缺血的心肌微循環(huán)具有改善作用：能增加心肌組織毛細(xì)血管數(shù)量，作用于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的Caveolin-1，升高外周耳、舌和心肌組織的StO<,2>，維持心肌氧供和氧利用，改善微循環(huán)功能。 (3)可視光StO<,2>測(cè)定是一種新的定量評(píng)價(jià)組織微循環(huán)功能的指標(biāo)，對(duì)血瘀證舌、面部望診的客觀化研究有重要價(jià)值。 (4)AMI患者介入治療后MCE檢測(cè)，寒凝血