人類精子中H-Y抗原mRNA的缺失與精子mRNA功能探討.pdf

1、作為生殖細(xì)胞的人類精子，承擔(dān)著將男性的遺傳物質(zhì)傳遞給下一代的重要任務(wù)。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為精子唯一的目的就是傳遞父本基因組，本身是終末分化細(xì)胞，已經(jīng)關(guān)閉基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)，但最近有越來越多的研究發(fā)現(xiàn)成熟精子中存在有大量而復(fù)雜的mRNA群體。本項(xiàng)研究旨在通過在精子mRNA中尋找H-Y抗原mRNA，來探討精子mRNA的保留機(jī)制以及精子mRNA可能執(zhí)行的功能。 本項(xiàng)研究采集健康男性志愿者的精液，通過上游法純化精子，使用多克隆抗H-Y抗原的IgY

2、抗體和FITC標(biāo)記的兔抗雞IgG對(duì)精子進(jìn)行免疫組化和流式細(xì)胞儀檢測(cè)，觀察成熟Y精子膜表面是否帶有H-Y抗原。為研究成熟精子mRNA是否含有H-Y抗原的mRNA，我們提取精子總RNA，用RT-PCR的方法進(jìn)行了分析。 免疫組化實(shí)驗(yàn)顯示可在許多精子的頭部與尾部的交界處非常清晰地看到H-Y抗原的熒光，通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)，被熒光素抗體標(biāo)記的H-Y抗原陽性精子的比例為49.86％。經(jīng)RT-PCR分析沒有從成熟精子mRNA中得到H-Y抗原m