榆干離褶傘溶栓酶對血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：研究榆干離褶傘溶栓酶對血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用。
　　方法：（1）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：經(jīng)H2O2誘導(dǎo)氧化損傷后，采用MTT法測定L.u溶栓酶對HUVEC存活率的影響；用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞線粒體跨膜電位與總活性氧含量；Western bolt方法檢測NF-κB-p65、iNOS、eNOS、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3等蛋白的表達(dá)；采用硝酸還原酶法檢測細(xì)胞的NO含量。（2）動物實(shí)驗(yàn)：建立血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂大鼠

2、模型，檢測外周血中循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)，并采用ELISA法測定血漿中AT-Ⅲ活力。
　　結(jié)果：（1）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)：MTT結(jié)果表明，L.u溶栓酶在一定濃度及時(shí)間范圍內(nèi)對H2O2誘導(dǎo)的氧化損傷有保護(hù)作用。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果表明，模型組線粒體跨膜電位低于正常組，而總活性氧高于正常組。與模型組比較，用藥組線粒體跨膜電位顯著升高，并降低了細(xì)胞內(nèi)活性氧。Western bolt結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組明顯增加NF-κB-p65蛋白表達(dá)，同時(shí)增加i

3、NOS、eNOS表達(dá)，并減少細(xì)胞中的NO含量。與模型組相比，用藥組可以明顯減少 NF-κB-p65蛋白表達(dá)，同時(shí)能減少 iNOS、eNOS表達(dá)，而且用藥組可以降低細(xì)胞中 NO含量。與正常組比較，模型組明顯增加 Caspase-8，Caspase-9，Caspase-3蛋白表達(dá)。與模型組相比，用藥組Caspase-8，Caspase-9，Caspase-3蛋白表達(dá)減少。（2）動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與正常組比較，造模大鼠外周血中循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)增