造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞免疫功能的研究.pdf

1、天然免疫和適應性免疫是機體的兩大免疫系統(tǒng)，它們相輔相成，構(gòu)成機體完整的免疫防御系統(tǒng)。天然免疫細胞成分除單核細胞、粒細胞、NK細胞、γδT細胞、DC外，還有紅細胞。越來越多的研究證實紅細胞天然免疫功能的變化與許多疾病的發(fā)生、發(fā)展及病理過程有著密切的相關(guān)，如腫瘤、自身免疫性疾病、血液病等。紅細胞免疫功能的測定對臨床上疾病診斷、療效觀察、探討發(fā)病機制等方面都有重要意義。我們對造血與淋巴組織腫瘤患者的紅細胞免疫功能進行研究，測定紅細胞CR1分子

2、的數(shù)量，檢測紅細胞CR1基因組密度多態(tài)性，并且對紅細胞天然免疫粘附功能以及對NK細胞殺傷活性的影響進行研究。實驗結(jié)果表明，造血與淋巴組織腫瘤患者的紅細胞CR1分子的數(shù)量、CR1基因組密度多態(tài)性、紅細胞天然免疫粘附功能及對正常NK細胞殺傷活性的影響與正常人均有顯著差異。實驗發(fā)現(xiàn)對造血與淋巴組織腫瘤免疫發(fā)病機制的探討、調(diào)動紅細胞和NK細胞的抗白血病作用，最終克服造血與淋巴組織腫瘤有重要的指導作用。 第一部分造血與淋巴組織腫瘤患者紅細

3、胞CRI分子的測定目的：檢測造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞CR1分子數(shù)量的變化，與正常人進行對照。方法：采集靜脈血，用FITC標記的鼠抗人CD35單抗標記紅細胞，應用流式細胞儀測定了24例造血與淋巴組織腫瘤患者、21例正常人紅細胞CR1分子的數(shù)量。結(jié)果：造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞CR1分子數(shù)量平均值為80.7±13.3個/紅細胞，健康對照的紅細胞CR1分子數(shù)量平均值為105.5±8.8個/紅細胞。造血與淋巴組織腫瘤患者與健康對照相比，其

4、每個紅細胞平均CR1分子數(shù)量減少，差異有顯著意義(t=7.234,p＜0.0001)。結(jié)論：造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞CR1分子數(shù)量較正常對照顯著下降，可能是導致其免疫功能的下降的原因之一。 第二部分造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞CR1基因組密度多態(tài)性測定目的：測定造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞CR1基因組密度多態(tài)性與正常人的不同，探討其CR1數(shù)量下降的原因。方法：采用PCR和HindⅢ酶切技術(shù)測定25例造血與淋巴組織腫瘤患者和2

5、3例正常人紅細胞CR1密度相關(guān)基因組的多態(tài)性。結(jié)果：正常人紅細胞CR1基因組密度多態(tài)性分布情況如下：HH型18例(78％)，HL型3例(13％)，LL型2例(9％)。造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞CR1基因組密度多態(tài)性分布情況：HH型18例(60％)，HL型7例(28％)，LL型3例(12％)。對照正常人，其HH型所占比例降低，HL型所占比例升高，但差異無顯著性。結(jié)論：造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞CR1基因組密度多態(tài)性HH型比例降低、HL

6、型比例升高，但與對照相比無顯著差異。遺傳基因的變化可能引起其紅細胞CR1分子數(shù)量的改變。 第三部分造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞天然免疫粘附功能(erythrocyteinnateimmuneadheringfunction，EIIAF)檢測目的：對紅細胞天然免疫粘附功能進行檢測，研究造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞天然免疫粘附白血病細胞的能力。方法：枸櫞酸鈉抗凝，紅細胞在自身血漿條件下對K562細胞形成免疫粘附，計算黏附率。結(jié)果：紅

7、細胞對K562細胞的免疫粘附形成了美麗的“玫瑰花”樣結(jié)合。正常人紅細胞對K562細胞的免疫粘附結(jié)合率為15.3％±6.4％(平均值±標準差)，造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞對K562細胞的免疫粘附結(jié)合率為7.6％±7.0％，與正常人相比顯著下降(t=3.61，p＜0.001)。結(jié)論：造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞對K562細胞的免疫黏附能力下降，與其CR1分子數(shù)量、CR1基因組密度多態(tài)性的變化一致。 第四部分造血與淋巴組織腫瘤患者紅

8、細胞對NK細胞殺傷活性的影響目的：研究造血與淋巴組織腫瘤患者紅細胞對NK細胞殺傷活性的影響，探討天然免疫細胞間的關(guān)系。方法：用MTT法測定紅細胞對正常NK細胞殺傷K562細胞活性的影響，與未加紅細胞的進行比較。結(jié)果：正常人外周靜脈血NK細胞占PBMNC的13.8％，不加紅細胞條件下，NK細胞殺傷K562細胞活性為67％～71％。正常人紅細胞明顯增加NK細胞殺傷K562細胞活性14.7％±5.2％，造血與淋巴組織腫瘤患者的紅細胞減低NK細