造血干細(xì)胞與淋巴細(xì)胞

1、造血干細(xì)胞與淋巴細(xì)胞,,什么是干細(xì)胞？,干細(xì)胞(stem cells)是一群尚未完全分化的細(xì)胞，同時(shí)具有分裂增殖成另一個(gè)與自身完全相同的細(xì)胞，以及分化成為多種特定功能的體細(xì)胞兩種特性。干細(xì)胞在生命體由胚胎發(fā)育到成熟個(gè)體的過程中，扮演最關(guān)鍵性的角色，即使發(fā)育成熟之后，一般相信干細(xì)胞仍然普遍存在于生命體中，擔(dān)負(fù)著個(gè)體的各個(gè)組織及器官的細(xì)胞更新及受傷修復(fù)等重大責(zé)任。,干細(xì)胞的分類,按分化潛能： 全能干細(xì)胞 多能干細(xì)胞

2、 定向祖細(xì)胞按來源： 胚胎干細(xì)胞 成體干細(xì)胞,,,全能干細(xì)胞 (Totipotent) 受精卵就是最高層次的胚胎干細(xì)胞，是全能干細(xì)胞。受精后的最初幾個(gè)小時(shí)內(nèi)，受精卵會(huì)分裂為一些完全相同的全能細(xì)胞，每一個(gè)均有可能發(fā)育成胎兒。 多能干細(xì)胞 (pluripotent) 一種或幾種組織的起源細(xì)胞，它能分化出多種類型的細(xì)胞，但它不可能分化出足以構(gòu)成完整個(gè)體的所有細(xì)胞。譬如造血干細(xì)胞，它

3、能分化成紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板等 十多種血細(xì)胞。,定向祖細(xì)胞(multipotent) 源于多能干細(xì)胞，具有向特定細(xì)胞系分化的能力，但其分化和自我更新能力受限，只能分化成一種或幾種專門的細(xì)胞，譬如淋系祖細(xì)胞。 前體細(xì)胞(precursor) 指發(fā)育過程中較另一細(xì)胞更早期的細(xì)胞，有時(shí)泛指干細(xì)胞和祖細(xì)胞。,胚胎干細(xì)胞,ES細(xì)胞是一種高度未分化細(xì)胞。它具有發(fā)育的全能性，能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官，包括生殖細(xì)胞。研究和利

4、用ES細(xì)胞是當(dāng)前生物工程領(lǐng)域的核心問題之一。在未來幾年，ES細(xì)胞移植和其它先進(jìn)生物技術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用很可能在移植醫(yī)學(xué)領(lǐng)域引發(fā)革命性進(jìn)步。目前是從廢棄的胚胎組織中做細(xì)胞培養(yǎng)來得到ES細(xì)胞，但除有倫理爭論，包括已死的胚胎的歸屬權(quán)問題，更有疾病傳染等不可控因素。,成體干細(xì)胞,成年動(dòng)物的許多組織和器官，比如表皮和造血系統(tǒng)，具有修復(fù)和再生的能力。成體干細(xì)胞在其中起著關(guān)鍵的作用。在特定條件下，成體干細(xì)胞或者產(chǎn)生新的干細(xì)胞，或者按一定的程序分化，形成新的

5、功能細(xì)胞，從而使組織和器官保持生長和衰退的動(dòng)態(tài)平衡。,造血干細(xì)胞,造血干細(xì)胞（hemapoietic stem cell，HSC）是各種血細(xì)胞與免疫細(xì)胞的起源細(xì)胞，可以增殖分化成為各種淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板、單核細(xì)胞及各種粒細(xì)胞等。HSC存在部位：胎肝、骨髓、外周血、臍帶血、胎盤血。,HSC可以不斷自我更新，其數(shù)量是穩(wěn)定的；多向分化增殖能力；多數(shù)HSC處于靜止?fàn)顟B(tài)；具有異質(zhì)性，可以分為多能干細(xì)胞和定向祖細(xì)胞兩個(gè)水平，后

6、者源于前者；形態(tài)上類似于小淋巴細(xì)胞；具有一定的表面標(biāo)志。,造血干細(xì)胞的生物學(xué)特性,HSC的動(dòng)態(tài)平衡可能與HSC不對稱分裂或細(xì)胞因子調(diào)節(jié)有關(guān)。正常造血干細(xì)胞每分裂一次，它的一個(gè)子代細(xì)胞分化為祖細(xì)胞(progenitors)，另一個(gè)細(xì)胞保持不分化，永不消滅，及所謂的非對稱性分裂。此外，由于所處環(huán)境的不同，干細(xì)胞可進(jìn)行有限的對稱性分裂，即每分裂一次可產(chǎn)生兩個(gè)干細(xì)胞/祖細(xì)胞。非對稱分裂是以前大家公認(rèn)的干細(xì)胞分裂模式，它能較合理地解釋穩(wěn)態(tài)造血

7、。但是考慮到在胚胎期及骨髓移植后的確有造血干細(xì)胞的擴(kuò)增，對稱性分裂也可能存在。－－華中科技大學(xué)黃士昂教授于1995年至1998年在加州大學(xué)圣地亞哥分校腫瘤中心任副研究員時(shí)首次發(fā)現(xiàn)HSC的非對稱分裂。,造血干細(xì)胞的起源,造血干細(xì)胞在人胚胎2周時(shí)可出現(xiàn)于卵黃囊，第4周開始轉(zhuǎn)移至胚肝，妊娠5個(gè)月后，骨髓開始造血；出生后骨髓成為造血干細(xì)胞的主要來源，在髓外造血組織中所占比例甚少，如在小鼠骨髓中105有核細(xì)胞中的有10個(gè)，在脾中105有核細(xì)胞中只

8、有1個(gè)，在外周血中105有核細(xì)胞中僅有0.2個(gè)。,出生前的造血部位,卵黃囊 骨髓 肝臟 脾 淋巴結(jié) 1 2

9、 3 4 5 6 7 8 9 10 月,,,,,,,,骨髓造血微環(huán)境,由微血管，神經(jīng)、基質(zhì)細(xì)胞(Stromal Cells)及細(xì)胞外基質(zhì)共同構(gòu)成的，對血細(xì)胞的增殖、分化、成熟有顯著調(diào)節(jié)作用，是血細(xì)胞增殖分化的“土壤”，也是調(diào)控造血的中心環(huán)節(jié)?；|(zhì)細(xì)胞：指骨髓中的網(wǎng)狀細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞、吞噬細(xì)胞和脂肪細(xì)胞。 細(xì)胞外基質(zhì)：主要由纖維組織構(gòu)成支架，其中有多種由基質(zhì)細(xì)胞分泌

10、和血液運(yùn)輸來的對血細(xì)胞生成有調(diào)控作用的物質(zhì)，如細(xì)胞因子、Fe、硫酸軟骨素、纖維連接蛋白、粘附分子。,人： CD34+CD33-CD38-CD45RA-c-kit-HLA-DR-Lin-Lin：CD3、CD4、CD14、CD16、CD19、CD41、CD56等；,HSC的表面標(biāo)志,小鼠HSC的表面標(biāo)志,HSC的分化,HSC分化過程,全能干細(xì)胞 多能干細(xì)胞 祖細(xì)胞 終末

11、細(xì)胞 BFU-E CFU-E 紅細(xì)胞 髓系 CFU-GM 單核/巨噬、中性粒 CFU-GEMM CFU-Eos 噬酸粒

12、 CFU-Baso 噬堿粒 HSC CFU-Meg 巨核/血小板

13、 CFU-TL TL 淋巴系 CFU-BL BL CFU-NK

14、 NK,,,,造血細(xì)胞生長因子和白介素的調(diào)控,____________________________________ SC E Meg N Eo BA M BL TLIL-1 + (+) (+) (+) (+) - (+) + +IL-2 -

15、 - - - - - - + ++IL-3 + + + + + ++ + - -IL-4 - (+) (+) (+) (+) ++ - + +IL-5

16、 - - - - ++ - - ++ +-IL-6 全髓增殖因子IL-11 全髓增殖因子GM-CSF + + + + ++ - + - -G-CSF （+）（+） （+） ++

17、 - - + - -M-CSF + + - -EPO - ++ - - - - - - -TPO 巨核系

18、________________________________________________________,HSC移植(SCT),造血干細(xì)胞移植是指將別人或自己的HSC移植到經(jīng)超劑量放、化療的患者體內(nèi)，替代原有的病理性或缺陷的HSC，以重建造血和免疫功能。,SCT的種類,異基因骨髓移植(Allo-BMT)自體骨髓移植(ABMT)外周造血干細(xì)胞移植(PBSCT)臍血干細(xì)胞移植(CBSCT),SCT適應(yīng)癥,惡性血液?。杭毙?/p>

19、白血病、慢性白血病、骨髓增生異常綜合征、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤等。惡性非血液病：乳腺癌、肺癌、卵巢癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、其他實(shí)體瘤等。非惡性疾?。涸偕系K性貧血、珠蛋白合成障礙性貧血、夜間陣發(fā)性血紅蛋白尿、骨髓纖維化、骨髓增殖性疾病、自身免疫性疾病、放射病等。 先天性免疫缺陷病、先天性造血異常癥、先天性骨骼異常、粘多糖儲(chǔ)積癥、粘蛋白脂質(zhì)代謝病、微粒體病等。,外周造血干細(xì)胞移植的優(yōu)點(diǎn),采集時(shí)不使用麻醉劑及骨穿；造血及免疫重建快 ；

20、可提供較骨髓更多的干細(xì)胞；可以富集CD34+細(xì)胞提高干/祖細(xì)胞的濃度；能去除引起GVHD的T淋巴細(xì)胞；能去除腫瘤細(xì)胞。,SCT的先期條件,年齡45歲以下，根據(jù)患者具體情況，要衡利弊選擇病人，包括禁忌癥，移植效果和經(jīng)濟(jì)費(fèi)用等情況；自體移植年齡可超過60歲。白血病病情處于CR期（無臨床癥狀，體征、血液學(xué)檢查正常），無中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病跡象。與供髓者ABO血型相合或供者為O型、HLA相配、混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)刺激指數(shù)小于3，交叉淋巴細(xì)

21、胞毒試驗(yàn)陰性。無影響移植的疾?。ㄖ饕切?、肝、肺、腎）。移植前輸血少，或輸血較多，但時(shí)間已超過3個(gè)月者。,造血干細(xì)胞與基因治療,為了帶有目的基因的細(xì)胞在病人體內(nèi)長期或永久地表達(dá)，必須選一種能在體內(nèi)自我更新和自我維持的永不消亡的細(xì)胞作為宿主細(xì)胞。造血干細(xì)胞具有可以執(zhí)行和自我更新能力，在體內(nèi)常態(tài)造血過程中永不耗竭；同時(shí)它又可在分化過程中保持基因組DNA的相對穩(wěn)定。因此，造血干細(xì)胞一直是基因治療理想的靶細(xì)胞之一。,造血干細(xì)胞用于基因治療的

22、難點(diǎn),干細(xì)胞數(shù)量不足。干細(xì)胞通過不對稱性的有絲分裂，在不斷產(chǎn)生祖細(xì)胞的同時(shí)，使自己不增殖也不分化。有國外學(xué)者報(bào)告認(rèn)為正常造血干細(xì)胞是不能擴(kuò)增的。許多人熱衷于體外擴(kuò)增干細(xì)胞，但至今未見有成功的報(bào)告。這是因?yàn)槟壳斑€缺乏一種模擬體內(nèi)造血微環(huán)境的培養(yǎng)體系，希望正常干細(xì)胞在培養(yǎng)中既大量增殖，又不分化，這實(shí)際上意味著細(xì)胞的惡性生長。此外，迄今為止，造血干細(xì)胞還沒有一個(gè)體外培養(yǎng)集落檢測的方法。,基因轉(zhuǎn)染率太低?；蛑委煶Ｓ玫哪孓D(zhuǎn)錄病毒顆粒要進(jìn)入靶細(xì)胞

23、，首先必須是病毒顆粒的外殼糖蛋白gpTO和靶細(xì)胞表面受體專一性的結(jié)合。與小鼠不同，人的造血干細(xì)胞表面逆轉(zhuǎn)錄病毒受體(PIT-2受體)數(shù)量極少，限制了轉(zhuǎn)染效率。此外，逆轉(zhuǎn)錄病毒只能感染分裂細(xì)胞，對處于靜止?fàn)顟B(tài)的HSC效率很低。目前，慢病毒載體因其可以轉(zhuǎn)導(dǎo)靜止細(xì)胞的特性而在基因治療中越來越受重視。,淋巴細(xì)胞,淋巴細(xì)胞：1012/個(gè)體，占外周血白細(xì)胞總數(shù)的20－45％，具有很強(qiáng)的異質(zhì)性。根據(jù)免疫功能的不同，分為： 1、T細(xì)胞(T L

24、ymphocyte, TL) 2、B細(xì)胞(B Lymphocyte, BL) 3、NK細(xì)胞(natural kill cells, NK),T淋巴細(xì)胞,介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答，并在TD－Ag誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要的作用。TL的分化發(fā)育： 前TL 胸腺皮質(zhì) 髓質(zhì) T淋巴細(xì)胞,,,,T細(xì)胞的分化和發(fā)育,絕大多數(shù)胸腺細(xì)胞不能識別胸腺上皮細(xì)胞表面的自身MHC分子經(jīng)陽性選

25、擇而在皮質(zhì)內(nèi)凋亡；通過陽性選擇的胸腺細(xì)胞(能識別自身MHC分子，即獲得了自身MHC限制性)向髓質(zhì)遷移，那些與樹突狀細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面的自身MHC—肽復(fù)合物呈高親和力的會(huì)經(jīng)陰性選擇而凋亡，最終輸出到外周的成熟T細(xì)胞也就具有了自身耐受性。,,,T細(xì)胞的表面標(biāo)志,T細(xì)胞的膜表面標(biāo)志主要有各種表面受體、表面抗原和黏附分子，是T細(xì)胞識別抗原、與其他免疫細(xì)胞相互作用以及接受信號刺激并產(chǎn)生應(yīng)答的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是鑒別和分離T細(xì)胞的重要依據(jù)。,T細(xì)胞表面受

26、體,T細(xì)胞抗原受體(TCR)：T細(xì)胞特異性識別抗原的受體，也是所有T細(xì)胞特征性的表面標(biāo)志。細(xì)胞因子受體(CKR)：可接受來自各種細(xì)胞因子的信號，調(diào)節(jié)T細(xì)胞的活化、增殖和分化。病毒受體：CD4是HIV病毒的受體 AIDS。有絲分裂原受體：臨床上可用于檢測機(jī)體細(xì)胞免疫功能的活性。,,T細(xì)胞抗原受體(TCR),結(jié)構(gòu)： TCR復(fù)合體＝TCR＋CD3分子功能： 是T細(xì)胞特異性識別抗原的受體。傳遞結(jié)合

27、抗原的信息到細(xì)胞內(nèi)，使T細(xì)胞活化。,TCR復(fù)合體,TCR識別APC遞呈的MHC:抗原肽復(fù)合物，CD3不直接識別抗原，當(dāng)TCR接受抗原刺激信號后，CD3分子的ITAM酪氨酸磷酸化，激活信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，啟動(dòng)T細(xì)胞的活化過程。,TCR必須同時(shí)識別相應(yīng)的抗原肽和相應(yīng)的MHC分子,T細(xì)胞表面抗原,MHC抗原白細(xì)胞分化抗原(CD分子) CD3 CD4/8 CD2 CD28/CD152,CD4和

28、CD8分子,CD4分子：單鏈糖蛋白，分布于部分T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞、某些B細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞和腦細(xì)胞。 功能：MHC-II類分子的配體 HIV受體CD8分子：異二聚體，分布于部分T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和NK細(xì)胞。 功能：MHC-I類分子的配體,CD2分子,CD2分子(淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-2，LFA-2；綿羊紅細(xì)胞(SRBC)受體)： 表達(dá)于成熟T細(xì)胞、部分胸腺細(xì)胞和NK細(xì)胞。CD2的配

29、基是CD58。CD2與CD58結(jié)合，可增強(qiáng)T細(xì)胞和APC細(xì)胞或靶細(xì)胞之間的粘附，促進(jìn)TCR/CD3復(fù)合體聚合而活化T細(xì)胞，并完成CD2分子介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。,CD28與CD80(B7-1)/CD86(B7-2),CD28是同源二聚體，在外周血淋巴細(xì)胞中，所有CD4+T細(xì)胞和50%CD8+T細(xì)胞表達(dá)CD28?；罨疶細(xì)胞表面CD28表達(dá)水平升高。CD28胞漿區(qū)與多種信號分子相連，轉(zhuǎn)導(dǎo)T細(xì)胞活化的共刺激信號。CD28分子的配體是表達(dá)于B細(xì)胞

30、等抗原遞呈細(xì)胞表面的B7家族分子，包括CD80（B7-1）/CD86（B7-2）。CD28與CD80（B7-1）/CD86（B7-2）是一組最重要的共刺激分子，它們之間的結(jié)合提供T細(xì)胞活化必需的第二信號。,協(xié)同刺激,T細(xì)胞和APC的膜表面分子,CD152分子,CD152又稱細(xì)胞毒T細(xì)胞抗原4（cytotoxic T lymphocyte antigen 4, CTLA-4)，為同源二聚體，主要表達(dá)于活化T細(xì)胞，靜止T細(xì)胞不表達(dá)。CD

31、152與CD28高度同源，其配體都是B7-1和B7-2，但親和力顯著高于CD28。CD152與B7-1/B7-2結(jié)合將抑制活化T細(xì)胞的擴(kuò)增，對T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答起負(fù)調(diào)節(jié)作用。CD152屬于抑制性受體。,CD28和CTLA-4,CD45,白細(xì)胞共同抗原，存在與所有白細(xì)胞表面。CD45RA表達(dá)在靜止T細(xì)胞表面CD45RO表達(dá)在活化和記憶T細(xì)胞表面,T淋巴細(xì)胞亞群,根據(jù)CD抗原分亞群：

32、 CD4＋細(xì)胞亞群：T輔助細(xì)胞(Th)——釋 放細(xì)胞因子，促進(jìn) TL、BL分化、增

33、 殖。CD2＋、CD3＋ CD8＋細(xì)胞亞群：細(xì)胞毒T細(xì)胞(Tc， CTL)——釋放穿孔 素和顆粒酶，殺傷

34、 靶細(xì)胞。,T輔助細(xì)胞的功能,,,兩種TH細(xì)胞亞群的主要特性,━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 主要特性 TH1（炎癥性） TH2（輔助性）───────────────────────────────細(xì)胞因子產(chǎn)生種類 IL—2

35、 ＋ —IFNγ ＋＋ —TNFβ ＋＋ —GM-CSF ＋＋ ＋I(xiàn)L-3、4、5、6、10

36、、13 ＋＋ ＋＋免疫相關(guān)功能輔助全體抗體的產(chǎn)生 ＋ ＋＋輔助IgE的產(chǎn)生 — ＋＋誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞生長 — ＋＋誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞活化 ＋＋

37、 —誘導(dǎo)遲發(fā)型性超敏反應(yīng) ＋＋ —誘導(dǎo)Tc細(xì)胞活性 ＋＋ —在抗感染免疫中的作用 胞內(nèi)感染 胞外感染,,,,,NKT細(xì)胞,NKT細(xì)胞因其表面既有T細(xì)胞特有的TCR，又有NK細(xì)胞特有的抗原受體(鼠NK1.1/人CD161)而得名，

38、經(jīng)典NKT細(xì)胞主要分布于肝臟、骨髓和胸腺。NKT細(xì)胞具有獨(dú)特的限制性表達(dá)TCR庫，其TCR具有恒定表達(dá)的α鏈和偏向表達(dá)的β鏈。NKT細(xì)胞為固有免疫細(xì)胞，可通過其TCR識別樹突狀細(xì)胞、T、B淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面CD1d提呈的糖脂類抗原而被活化，也可通過其表面組成性表達(dá)的IL-12R和IL-2R與相應(yīng)細(xì)胞因子結(jié)合而被活化?；罨疦KT細(xì)胞具有細(xì)胞毒作用，可通過分泌表達(dá)穿孔素和FasL等細(xì)胞毒性介質(zhì)，使腫瘤和病毒感染的靶細(xì)胞溶解破壞或發(fā)生凋亡

39、；也可通過分泌IL-4和IFN-γ等細(xì)胞因子，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。,根據(jù)TCR分類：γδT細(xì)胞αβT細(xì)胞,兩種TCR受體的T細(xì)胞比較,γδT細(xì)胞 αβT細(xì)胞TCR類型 TCRγδ TCRαβ異二聚體 γ鏈＋δ鏈

40、 α鏈＋β鏈編碼基因 V-J-C;V-D-J-C V-J-C;V-D-J-CV區(qū)基因數(shù)目 較少,位于皮膚或同一黏膜 50 57 組織中的γδT細(xì)胞群體

41、 只表達(dá)一種相同的TCR體內(nèi)分布： 主要在黏膜和上皮組織中 主要在外周血 外周血 5～15% 60～70 % 腸道粘膜組織中 1

42、0% 少 皮膚下層 較多 少在胸腺內(nèi)出現(xiàn)的時(shí)間 較早 較遲CD抗原

43、 多數(shù)CD4—、CD8— CD4＋、CD8— 少數(shù)CD8＋ CD4—、CD8＋ 極少數(shù)CD4＋識別抗原受MHC限制 —

44、 ＋主要的免疫功能 參與非特異性免疫應(yīng)答， 參與特異性免疫應(yīng)答 在黏膜免疫、抗胞內(nèi)感 染、抗腫瘤中發(fā)揮作用。,抑制性T細(xì)胞,Treg細(xì)胞雙陰性T細(xì)胞：能夠抑制具有相同TCR特異性的C

45、D8+和CD4+ T細(xì)胞，從而抑制小鼠異體皮膚移植的排斥反應(yīng)。CD4＋CTL,Treg細(xì)胞,Treg細(xì)胞在胸腺內(nèi)發(fā)育成熟后輸出到外周血，約占小鼠或人類外周血CD4 + T細(xì)胞數(shù)的5%～10%，組成性表達(dá)CD25和CTLA-4。Treg細(xì)胞調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的結(jié)果之一是抑制過強(qiáng)的免疫反應(yīng)。腫瘤細(xì)胞可以通過促進(jìn)Treg細(xì)胞的增加，抑制T細(xì)胞和NK細(xì)胞的抗腫瘤效應(yīng)。,CD4＋CTL,CD4＋ CTL表達(dá)FasL，可以與激活的淋巴細(xì)胞(包括自己)和

46、激活的APC表面的Fas(CD95)結(jié)合，引起活化的淋巴細(xì)胞和激活的APC細(xì)胞凋亡，防止免疫應(yīng)答過度。其主要發(fā)揮旁觀者效應(yīng)殺傷靶細(xì)胞。,B淋巴細(xì)胞,是體內(nèi)產(chǎn)生Ig的細(xì)胞，并具有抗原遞呈功能。BL的分化發(fā)育： 前BL 幼BL 成熟BL 漿細(xì)胞,,,,成熟B細(xì)胞,漿細(xì)胞,漿細(xì)胞超微圖像,B細(xì)胞的膜表面標(biāo)志,B細(xì)胞表面受體： BCR－CD79a/b復(fù)合體

47、 細(xì)胞因子受體 補(bǔ)體受體 Fc受體 絲裂原受體,BCR－CD79a/b復(fù)合體,BCR的本質(zhì)是膜表面的免疫球蛋白，主要是mIgM和mIgD，與血清Ig不同之處是具有跨膜區(qū)，是鑒別B細(xì)胞的主要特征。BCR復(fù)合體＝BCR ＋ Igα ＋ Igβ (CD79a) (CD79b)BCR的胞內(nèi)區(qū)較

48、短，而Igα和Igβ的胞內(nèi)區(qū)較長，有免疫受體酪氨酸活化基序(ITAM)，其作用是激活酪氨酸激酶，傳遞B細(xì)胞活化信號。,B細(xì)胞抗原受體及BCR復(fù)合體,兩種淋巴細(xì)胞的抗原受體識別抗原分子的區(qū)別,B細(xì)胞表面抗原,MHC分子：包括MHCⅠ和MHCⅡ類分子。其中MHCⅡ類分子參與抗原的遞呈，還可增強(qiáng)B細(xì)胞以T細(xì)胞間的黏附作用。白細(xì)胞分化抗原(CD分子) CD19/CD21/CD81─協(xié)同受體復(fù)合 體 CD40

49、 B7,CD19/CD21/CD81,CD19是B細(xì)胞的表面標(biāo)志，從B細(xì)胞分化早期直到漿細(xì)胞前期都存在，參與B細(xì)胞的活化。CD21是補(bǔ)體受體，僅存在于成熟B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞表面，B細(xì)胞活化后即消失。CD21能與結(jié)合在BCR的抗原表面的C3b結(jié)合，以增強(qiáng)BCR與抗原的結(jié)合，同時(shí)將結(jié)合的信號傳導(dǎo)給CD19，為B細(xì)胞的活化提供輔助刺激信號。CD19/CD21/CD81組成協(xié)同受體復(fù)合體，功能上類似于T細(xì)胞的CD4/8，起輔助穩(wěn)定第一

50、信號的作用。,CD40：協(xié)同刺激受體，表達(dá)在B細(xì)胞、單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等，其配體是TL表面的CD40L(CD154)。為B細(xì)胞提供協(xié)同刺激信號使其進(jìn)入充分活化狀態(tài)。其作用與TL表面的CD28相同。B7(CD80/86)：表達(dá)在活化的B細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞表面。是TL表面CD28分子的配體，具有協(xié)同刺激因子的作用。,B細(xì)胞被TD抗原特異激活的步驟,B細(xì)胞亞群,B1(T細(xì)胞非依賴性細(xì)胞) B2(T細(xì)胞依賴性細(xì)胞)

51、 (CD5＋細(xì)胞) (普通B細(xì)胞)發(fā)生部位 胚肝 骨髓外周分布 腸道相關(guān)淋巴組織 脾

52、臟、淋巴結(jié)占外周血B細(xì)胞% 只占5～10% >90%表面分子 mIgM ＋ ＋ mIgD －

53、 ＋ CD5 ＋ －補(bǔ)充更新 自我更新 由骨髓更新產(chǎn)生抗體

54、 IgM IgM、IgG針對抗原 TI抗原，自身抗原 TD抗原免疫記憶 － ＋抗原遞呈

55、 － ＋,NK細(xì)胞,NK細(xì)胞(natural killer cells, NK cells)──表面缺少T細(xì)胞和B細(xì)胞的特異性表面標(biāo)志，能自發(fā)裂解多種腫瘤細(xì)胞和被病毒感染的細(xì)胞。是一群不需要抗原致敏，不需要抗體參與，就能殺傷靶細(xì)胞的淋巴細(xì)胞亞群，主要存在于外周血和脾臟中，在人外周血中占淋巴細(xì)胞的5－7%。,形態(tài)：大顆粒(溶

56、酶體)淋巴細(xì)胞，顆粒內(nèi)有穿孔素、顆粒酶(絲氨酸蛋白)表面分子： CD16－又叫FcγRⅢ，還見于巨噬細(xì)胞和粒細(xì)胞，介 導(dǎo)ADCC作用； CD56 CKR KAR/KIR功能：參與機(jī)體的抗病毒和抗腫瘤免疫。,NKR-P1,NKR-P1是人類NK細(xì)胞表面的KAR，屬于C型凝集素家族成員，為Ⅱ型跨膜糖蛋白。其胞膜外C型凝集素區(qū)域含有糖類蛋白識別受體，它們與巨噬

57、細(xì)胞表面糖類識別受體類似，能廣泛識別并結(jié)合分布于自身組織細(xì)胞、病毒感染細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞表面的糖類配體。NKR-P1分子胞漿區(qū)含有免疫受體酪氨酸活化基序(immunoreceptor tyrosine-based activation motif，ITAM)，可介導(dǎo)活化信號的傳遞。當(dāng)NKR-P1與相應(yīng)糖類配體結(jié)合后，可通過胞漿內(nèi)ITAM激活信號途徑，使NK細(xì)胞活化并產(chǎn)生殺傷作用。此ITAM激活信號途徑可被NK細(xì)胞表面KIR所產(chǎn)生的抑制信

58、號阻斷。,CD94／NKG2家族,CD94可通過二硫鍵與NKG2家族的不同成員組成異質(zhì)二聚體，其功能的發(fā)揮有賴于與其他受體的結(jié)合。NKG2家族包含一組也屬于C型凝集素超家族的II性跨膜蛋白，其中的幾種蛋白是不同剪接的結(jié)果。NKG2-A和NKG2-B具有很多的共同特性，胞漿內(nèi)都存在免疫受體酪氨酸抑制性信號傳導(dǎo)通路的氨基酸序列(ITIM)，并含有其他一些參與抑制性信號傳導(dǎo)通路的氨基酸序列，與CD94結(jié)合形成KIR，可與HLA-E結(jié)合抑制NK

59、細(xì)胞活化。NKG2-C的胞漿尾較短、無ITIM區(qū)和ITAM區(qū)，但其跨膜區(qū)富含Lys，可招募含ITAM的分子，可與CD94結(jié)合形成KAR，介導(dǎo)NK細(xì)胞活化。,NK細(xì)胞識別靶細(xì)胞的機(jī)制,靶細(xì)胞表面的MHC-I類分子表達(dá)低于正常細(xì)胞。NK細(xì)胞表面有識別MHCI類分子－自身多肽的受體——?dú)?xì)胞抑制性受體(Killer cell inhibitory receptors, KIRs)，和MHC-I類分子結(jié)合后產(chǎn)生抑制性信號，使NK細(xì)胞不能殺傷

60、正常細(xì)胞。NK細(xì)胞是通過KIRs識別丟失“自身MHCⅠ類分子和自身多肽復(fù)合物”的靶細(xì)胞 活化NK細(xì)胞 殺傷靶細(xì)胞。,,,KAR/KIR對NK細(xì)胞殺傷作用的調(diào)節(jié),NK細(xì)胞通過表面活化受體KAR與自身組織細(xì)胞、病毒感染細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞表面相應(yīng)糖類配體結(jié)合，可經(jīng)活化受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，產(chǎn)生殺傷作用；通過表面殺傷抑制受體KIR與細(xì)胞表面MHC-I類分子結(jié)合，可產(chǎn)生殺傷抑制信號，該信號在胞內(nèi)起主導(dǎo)作