SePEI-HeP-PCL原位催化NO生成人工血管的構建及功能評價.pdf

1、心血管疾病目前已經(jīng)成為威脅人類健康的“第一殺手”，血管移植是治療心血管疾病的最有效手段。NO是一種內(nèi)皮性舒張因子，能夠有效抑制血小板和炎癥細胞的黏附與激活，減少炎癥反應和內(nèi)膜增生，促進內(nèi)皮細胞生長。本實驗室合成了有機硒化合物——硒代聚乙烯亞胺(SePEI)，能夠模擬體內(nèi)的一種含硒催化酶——谷胱甘肽過氧化物酶，催化體內(nèi)的RSNO釋放產(chǎn)生NO。本研究以聚己內(nèi)酯(PCL)為基質(zhì)材料，利用靜電紡絲技術制備由納米纖維形成的具有仿生多孔結構的人工血

2、管支架，然后分別以有機硒催化劑SePEI為聚陽離子、以肝素為聚陰離子進行層層自組裝，從而構建具有NO原位生成功能的人工血管材料，并對該血管支架的進行功能評價。
　　本研究的第一部分（第二章）是血管支架材料的制備。通過層層自組裝的方法，在PCL電紡纖維膜上引入SePEI和肝素，并通過掃描電子顯微鏡觀察了層層自組裝之前和之后材料的微觀形貌，發(fā)現(xiàn)層層自組裝并沒有影響材料的微觀形貌。體外催化NO釋放實驗顯示，隨著組裝層數(shù)的增加和NO累積釋

3、放量檢測時間的延長，催化生成NO的量在逐步增加。成纖維細胞增殖實驗表明，SePEI和肝素的引入并沒有增加材料的細胞毒性。根據(jù)體外催化NO釋放實驗和成纖維細胞增殖實驗的結果，選擇SePEI和肝素組裝十層的材料進行后續(xù)的功能評價實驗。
　　本研究的第二部分（第三章）是對血管支架材料的性能和生物功能進行評價。靜態(tài)接觸角的測試結果顯示SePEI和肝素的層層自組裝在一定程度上改善了材料的親水性，更有利于構建血管支架。力學性能測試的結果顯示S

4、ePEI和肝素的層層自組裝并沒有降低材料的力學性能，仍然能夠滿足作為血管支架的力學要求。血小板黏附實驗的結果顯示SePEI和肝素的層層自組裝夠抑制血小板的黏附，這對于抑制材料移植之后的急性血栓非常重要。將材料進行大鼠皮下埋植并在一周和兩周時取出，進行H&E染色可以看出實驗組的材料引起的組織反應性較低，說明材料的組織相容性較好。本研究對所構建的血管支架材料進行了一系列的細胞實驗，包括內(nèi)皮細胞的黏附和增殖，平滑肌細胞的黏附和鋪展，巨噬細胞的

5、黏附等。在材料上進行內(nèi)皮細胞培養(yǎng)的實驗結果顯示能夠催化生成NO的實驗組材料能夠促進內(nèi)皮細胞的增殖和黏附，這對于血管支架的快速內(nèi)皮化具有重要的意義。在材料上進行平滑肌細胞培養(yǎng)的實驗結果顯示能夠催化生成NO的實驗組材料平滑肌細胞的黏附和鋪展程度低，推測NO催化生成材料能夠抑制平滑肌細胞增殖，這樣能夠防止血管支架移植到體內(nèi)之后發(fā)生再狹窄。在材料上進行巨噬細胞培養(yǎng)的實驗結果顯示，催化生成NO的實驗組材料能夠抑制巨噬細胞的激活，這對于降低材料移植