早期類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎寒熱證候基因組信息學(xué)研究初探.pdf

1、Y9358醚j密級(jí)l——分類號(hào)——單位代碼墨i絲學(xué)號(hào)呈璺她嫂嫂嬰中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院Z003級(jí)碩士研究生學(xué)位論文早期類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎寒熱證候基因組信息學(xué)研究初探申請(qǐng)人：呂誠(chéng)專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)研究方向：痹證(類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)發(fā)生機(jī)理的研究導(dǎo)師：呂愛(ài)平研究員中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院基礎(chǔ)理論班究所2006年5月北京中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院碩士畢業(yè)論文中文摘要中文摘要目的分離純化類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)不同證型患者及正常人外周血CD4T淋巴細(xì)胞，提取細(xì)胞總RNA，利用高通

2、量的全基因組芯片對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，探索RA患者寒熱證候之間、RA患者與正常對(duì)照之間差異基因表達(dá)的微觀基礎(chǔ)。研究對(duì)象和方法研究思路：隨機(jī)選取符合納入標(biāo)準(zhǔn)的RA女性患者33例，參照相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行寒、熱證候辨別。取患者晨起空腹靜脈血，利用淋巴細(xì)胞分離液，分離純化CD4T淋巴細(xì)胞，提取細(xì)胞的總RNA，與全基因組芯片進(jìn)行雜交并檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果采用t檢驗(yàn)、方差分析等方法作統(tǒng)計(jì)分析，找出寒熱證候之間、正常人與患者之間差異表達(dá)的基因，并對(duì)篩選出的差異基因作聚類

3、分析，對(duì)結(jié)果作實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)驗(yàn)證。1研究對(duì)象11病例收集2004年1月至2005年1月，隨機(jī)選取項(xiàng)目合作單位(中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院、北京中日友好醫(yī)院)門(mén)診及風(fēng)濕科住院女性患者33例，年齡20～60歲。納入病例中寒證患者為21例，熱證患者為12例。正常對(duì)照組取自同期中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院門(mén)診體檢女性，計(jì)12例，年齡20～40歲，正常對(duì)照組依據(jù)體檢結(jié)果排除了感染、炎癥等影響因素。12病例納入標(biāo)準(zhǔn)疾病診斷、病情進(jìn)展分類標(biāo)準(zhǔn)：參照1987年美

4、國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ARA)修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)擬定。證候診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照1993年衛(wèi)生部《中藥新藥治療痹病的臨床研究指導(dǎo)原則》、1994年國(guó)家中醫(yī)藥管理局發(fā)布的《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)旭痹的診斷依據(jù)、證候分類、療效評(píng)定》、1997年中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《中醫(yī)l臨床診療術(shù)語(yǔ)證候部分》和1988年全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合風(fēng)濕類疾病學(xué)術(shù)會(huì)議擬訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)。寒、熱證候診斷標(biāo)準(zhǔn)：寒證：①關(guān)節(jié)冷痛重著，屈伸不利；②關(guān)節(jié)拘急，局部畏寒，皮色不紅；③舌胖，質(zhì)淡，苔白；脈弦緊