家兔腸道細(xì)菌的篩選、鑒定及部分菌種生長(zhǎng)特性的研究.pdf

1、本試驗(yàn)選用不同培養(yǎng)基，對(duì)兔腸道微生物進(jìn)行分離培養(yǎng)，篩選優(yōu)勢(shì)菌株，并研究其生長(zhǎng)特性。 試驗(yàn)1：選用MRS、MRS+10％家兔軟糞浸出液、MRS+10％家兔硬糞浸出液和MRS+10％泡菜汁四種培養(yǎng)基，對(duì)斷奶仔兔和生長(zhǎng)兔回腸、盲腸的微生物分別進(jìn)行需氧和厭氧培養(yǎng)。根據(jù)可培養(yǎng)細(xì)菌菌落特征、染色特性和顯微鏡形態(tài)觀測(cè)對(duì)不同菌株進(jìn)行劃線分離，并對(duì)純化菌株進(jìn)行生化試驗(yàn)，鑒定其種屬。對(duì)經(jīng)鑒定可用作益生菌的菌種進(jìn)行安全性試驗(yàn)。結(jié)果表明：①M(fèi)Rs+10

2、％家兔軟糞浸出液培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物種類明顯高于其他培養(yǎng)基，是分離篩選家兔腸道微生物的適宜培養(yǎng)基。②根據(jù)菌落形態(tài)，革蘭氏染色特性及顯微鏡形態(tài)觀測(cè)，共分離出37株菌株，其中需氧菌22株，厭氧菌15株。結(jié)合生化試驗(yàn)綜合鑒定，在需氧菌株中，分離出大腸桿菌屬2株，糞球菌屬2株，腸球菌屬1株，顯核菌屬1株，短乳桿菌屬2株，布氏乳桿菌屬1株，蠟狀芽孢桿菌1株，唾液乳桿菌1株，檸檬酸細(xì)菌屬2株，其余9株未鑒定。厭氧菌株中，梭桿菌屬3株，雙歧桿菌屬2株

3、，韋榮氏球菌屬1株，乳桿菌屬2株，明串球菌屬2株，9為乳球菌屬，擬桿菌屬2株，其余2株未鑒定。③篩選的1 3株優(yōu)勢(shì)菌株中需氧菌7株，分別為糞球菌屬2株，腸球菌屬1株，乳桿菌屬2株，2株未鑒定種屬；厭氧菌6株，分別為梭桿菌屬1株，雙歧桿菌屬1株，乳桿菌屬1株，乳球菌屬1株，明串球菌屬1株，擬桿菌屬1株。④斷奶仔兔盲腸中需氧菌株數(shù)極顯著高于回腸(P<0.01)，厭氧菌株數(shù)稍高于回腸，但差異不顯著；青年兔盲腸中需氧菌和厭氧菌株數(shù)均顯著高于回腸

4、(P<0.05)。⑤從優(yōu)勢(shì)菌株中初步選出6株細(xì)菌，分別為糞球菌屬2株、乳桿菌屬1株、乳球菌屬1株、雙歧桿菌屬1株、明串球菌屬1株，安全性試驗(yàn)結(jié)果表明，上述株菌發(fā)酵液對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠健康狀況無(wú)不良影響。 試驗(yàn)2：對(duì)所得安全菌株的生長(zhǎng)曲線、耐酸、耐膽鹽能力，以及對(duì)抗生素的敏感性研究表明：①初選菌株中1株糞球菌開始生長(zhǎng)較慢，其他菌株生長(zhǎng)在4～6h都達(dá)到生長(zhǎng)高峰，增殖速度快。②菌株的生長(zhǎng)速度隨pH降低而下降，但所有初選菌株在pH 2時(shí)仍然都能