康艾注射液對(duì)小鼠的放射保護(hù)作用及機(jī)制的探討.pdf

1、目的：研究輻射損傷的機(jī)制并在此基礎(chǔ)上探討康艾注射液對(duì)小鼠的亞急性放射損傷有無保護(hù)作用，若有，進(jìn)一步探討其保護(hù)作用的機(jī)理。 方法：(1)180只小鼠隨機(jī)分為0、2和18Gy3個(gè)劑量組，三個(gè)組分別為20、60、100只。分別用X射線全身照射1次，接受2Gy和18Gy輻射的小鼠再分別分為兩組，各為30只和50只。試驗(yàn)組用康艾注射液干預(yù)，對(duì)照組等量生理鹽水，方法相同。于照射后4h、3d和14d，分別抽取小鼠眼球血，用流式細(xì)胞儀進(jìn)行外周血

2、T淋巴細(xì)胞亞群CD4<'+>和CD8<'+>的測(cè)定。同時(shí)活殺小鼠取其胸腺和脾臟，石蠟包埋后，觀察光鏡及電鏡下的變化。另取出新鮮胸腺和脾臟分別研碎，制成細(xì)胞懸液，用流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞凋亡率。部分細(xì)胞懸液用多聚賴氨酸處理的玻片涂片備免疫組化用，測(cè)小鼠胸腺淋巴細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2蛋白和Bax蛋白的陽性細(xì)胞率。(2)實(shí)驗(yàn)小鼠共80只，分為4組，每組20只。照射前每組小鼠均取血做白細(xì)胞計(jì)數(shù)?？蛋M與輻射對(duì)照組均以同一劑量照射一次。照射后康艾

3、組共三組分別進(jìn)行不同劑量康艾注射液的干預(yù)，五天后取血作白細(xì)胞計(jì)數(shù)，同時(shí)觀察小鼠平均存活時(shí)間或30d存活率。輻射對(duì)照組用生理鹽水平衡。 結(jié)果：光鏡下改變：輻射后小鼠胸腺皮質(zhì)淋巴細(xì)胞急劇下降，第三天降至最低水平，第14天胸腺結(jié)構(gòu)開始恢復(fù)。電鏡：輻射后4小時(shí)小鼠胸腺淋巴細(xì)胞出現(xiàn)典型的細(xì)胞凋亡的改變。不同劑量的X線照射4h后，胸腺和脾臟細(xì)胞的凋亡率即明顯升高，三天時(shí)達(dá)高峰，十四天時(shí)略有恢復(fù)。外周血淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量改變，其中以CD8<'+

4、> T細(xì)胞對(duì)輻射最為敏感，下降幅度最大?？蛋幬锝M與輻射對(duì)照組比較，其對(duì)接受2Gy和18Gy輻射小組胸腺細(xì)胞調(diào)亡率均有明顯抑制作用(P<0.05)。對(duì)接受2Gy輻射的小鼠，Bcl-2蛋白的表達(dá)和Bax蛋白的表達(dá)輻射24h和第3天時(shí)康艾注射液組與輻射對(duì)照組比較(P<0.05)有差別?？蛋⑸湟簩?duì)接受2Gy輻射的小鼠，可以促進(jìn)Bcl-2蛋白的表達(dá)，抑制Bax蛋白的表達(dá)；輻射第14天時(shí)，輻射對(duì)照組與康艾注射液組比較(P>0.05)，Bcl-2

5、和Bax蛋白的表達(dá)趨于接近。對(duì)接受8Gy輻射小鼠，輻射24h、3d、14d后康艾注射液組與輻射對(duì)照組比較均為(P>0.05)，康艾注射液對(duì)接受8Gy輻射小鼠Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表達(dá)，無明顯影響?？蛋⑸湟嚎娠@著延長受7.5Gy照射小鼠平均存活時(shí)間，提高30d存活率和白細(xì)胞數(shù)。康艾藥物組與輻射對(duì)照組比較，受照射小鼠WBC明顯升高(P<0.05)。 結(jié)論：康艾注射液能明顯抑制接受2Gy輻射的小鼠和8Gy輻射小鼠的胸腺、脾臟細(xì)