慢腎1號(hào)方對(duì)系膜增生性腎炎小鼠α-SMA、TGF-β1影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本文通過建立改良的慢性血清病系膜增生性腎小球腎炎(MsPGN)動(dòng)物模型，應(yīng)用慢腎1號(hào)方對(duì)該模型進(jìn)行干預(yù)性治療，通過觀察MsPGN小鼠模型尿蛋白、血清腎功能指標(biāo)、腎臟病理形態(tài)學(xué)以及腎組織α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)表達(dá)的變化，進(jìn)一步明確慢腎1號(hào)方對(duì)系膜增生性腎小球腎炎的治療作用，并探討其治療系膜增生性腎小球腎炎的可能作用機(jī)理，為慢腎1號(hào)方更好的應(yīng)用于臨床提供相關(guān)理論依據(jù)。 方法：昆明種

2、小鼠40只，采用雙后足墊皮下注射完全弗氏試劑(CFA)的方法進(jìn)行預(yù)免疫后，腹腔注射牛血清白蛋白(BSA)并尾靜脈注射大腸桿菌內(nèi)毒素(LPS)進(jìn)行免疫，復(fù)制系膜增生性腎小球腎炎小鼠模型。造膜后，選取24小時(shí)尿蛋白總量及血肌酐、尿素氮明顯升高(均較造模前出現(xiàn)顯著性差異)的小鼠20只，隨機(jī)分為模型組、慢腎1號(hào)方組，每組10只，并以正常昆明種小鼠10只為正常組。各組小鼠每天灌胃給藥一次，連續(xù)4周。治療組喂以慢腎1號(hào)方0.5ml/只，正常組和模型

3、組均喂以生理鹽水0.5ml/只。治療后用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定各組小鼠尿蛋白含量，分別用苦味酸除蛋白法和二乙酰—肟法測(cè)定各組小鼠血肌酐和尿素氮的含量，在光鏡下觀察各組小鼠腎組織病理學(xué)改變情況，采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組小鼠腎組織中α-SMA、TGF-β1的表達(dá)情況，并用病理圖象分析系統(tǒng)對(duì)免疫組化染色結(jié)果進(jìn)行半定量分析。 結(jié)果：24小時(shí)尿蛋白含量測(cè)定：模型組和慢腎1號(hào)方組均出現(xiàn)蛋白尿。與J下常組相比，模型組小鼠24小時(shí)尿蛋白顯著升高(P

4、<0.01)，慢腎1號(hào)方組24小時(shí)尿蛋白含量與模型組比較明顯降低(P<0.0 1)，且與正常組無顯著差異。腎功能檢測(cè)結(jié)果：模型組小鼠尿素氮(BUN)、血肌酐(cr)與正常組相比顯著升高(P<0.0 1)。慢腎1號(hào)方組與模型組相比BUN、Cr均明顯降低(P<0.01)。腎組織光鏡學(xué)觀察：慢腎1號(hào)方組與模型組相比腎小球系膜區(qū)的寬度明顯減小，系膜細(xì)胞增生和系膜基質(zhì)積聚等超微結(jié)構(gòu)病變明顯減輕。腎組織中α-SMA表達(dá)的免疫組化結(jié)果：模型組腎小球系

5、膜區(qū)內(nèi)可見大量α-SMA陽(yáng)性表達(dá)，尤其以腎小球血管極多見，慢腎1號(hào)方組α-SMA在腎小球的表達(dá)較模型組有明顯減少。半定量分析顯示，與正常組相比，模型組的腎小球α-SMA相對(duì)含量顯著增高(P<0.01)。與模型組相比，慢腎1號(hào)方組的腎小球α-SMA相對(duì)含量顯著降低(P<0.01)。腎組織中TOF-β1表達(dá)的免疫組化結(jié)果：模型組可以見到TGF-β1大量表達(dá)在毛細(xì)血管袢及系膜區(qū)，同時(shí)在腎間質(zhì)的表達(dá)亦明顯增多。慢腎1號(hào)方組TGF-β1在腎小球的

6、表達(dá)與模型組相比明顯減少。半定量分析顯示，正常組相比，模型組的腎小球TGF-β1相對(duì)含量顯著增加(P<0.01)。與模型組相比，慢腎1號(hào)方組的腎小球TGF-β1相對(duì)含量顯著降低(P<0.01)。結(jié)論：1、慢腎1號(hào)方能夠顯著減少M(fèi)sPGN小鼠尿蛋白，降低血肌酐和尿素氮，促進(jìn)腎小球病理?yè)p害的修復(fù)。進(jìn)一步證實(shí)了其保護(hù)腎功能的作用。2、慢腎1號(hào)方可以抑制MsPGN小鼠腎組織α-SMA的表達(dá)，具有抑制腎小球系膜細(xì)胞的增殖的作用。3、慢腎1號(hào)方可以