小葉苦丁茶質(zhì)量控制方法研究與紫草科苦丁茶的親緣學意義初探.pdf

1、“苦丁茶”作為一類非茶類的代茶飲品，一種重要的藥茶兩用植物在我國應(yīng)用已有兩千年的歷史。目前市場上苦丁茶有兩大類主流品種，分別為冬青科的大葉冬青和苦丁茶冬青(大葉苦丁茶)；木犀科的粗壯女貞及其他幾種植物(小葉苦丁茶)。藤黃科及紫草科的幾種植物在少部分地區(qū)作為苦丁茶使用。由于其基源復(fù)雜、品種混亂，對苦丁茶的質(zhì)量控制帶來難題，從苦丁茶的資源利用到市場應(yīng)用都具有盲目性。 本文先后以小葉苦丁茶和紫草科苦丁茶為研究對象，對其質(zhì)量控制方法及化

2、學成分等方面進行系統(tǒng)研究。具體內(nèi)容如下： 1.首先，對小葉苦丁茶的主流品種粗壯女貞化學成分分離鑒定，為質(zhì)量控制研究提供定性定量用的標準品，共分離了18個化合物，鑒定了其中的16個。這些化合物分別為：ligustaloside B(1)，ligustaloside B di—Meacetal(2)，ligustaloside A(3)，acteoside(4)，ligupurpuroside A(5)，isoacteoside(6

3、)，ligupurpuroside B(7)，ligupurpuroside D(8)，osmanthuside B6(9)，ligupurpuroside C(10)，3，4—dihydroxyphenyl(11)，lipedosideB—Ⅲa(12)，lipedosideB—Ⅲb(13)，glucoseestersof(E)—2，6—dimethyl—6—hydroxyocta—2，7—dienoicacid(14)，luteoli

4、n—7—O-β—D—glucopyranoside(15)，rutin(16)。其中有8個化合物為首次從該種植物中分離得到，2個為首次從該屬植物中分離得到。 2.對收集到的小葉苦丁茶84個批次的樣品進行水提取物的指紋圖譜研究。 分別建立了小葉苦丁茶老葉原植物(35個批次)和芽的商品(18個批次)HPLC指紋圖譜共有模式，通過系統(tǒng)聚類分析可將老葉原植物分成3類，第Ⅲ類為除粗壯女貞外的非主流品種的小葉苦丁茶，利用第一類和第二

5、類27個批次樣品生成的對照圖譜共有模式可進一步將非主流品種老葉樣品區(qū)分開。同時將商品老葉導(dǎo)入指紋圖譜共有模式中，可以確定其是否為主流品種粗壯女貞。通過對全國各地買的小葉苦丁茶18個批次的芽商品指紋圖譜分析發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)聚類分析和相似度評價均不能將不同產(chǎn)地及品種的芽商品區(qū)分開，樣品色譜峰整體化學信息非常相似，因此我們選擇它們共有的特征性成分作為市場上小葉苦丁茶質(zhì)量評價的指標對其進行進一步質(zhì)量控制研究。 3.對小葉苦丁茶中的特征性成分苯乙

6、醇苷及環(huán)烯醚萜苷類成分推導(dǎo)ESI—MS/MS裂解規(guī)律，將指紋圖譜中所反映的化學成分信息通過各色譜峰的ESI—MS/MS碎片，結(jié)合文獻檢索及與標準品比對的方法，使得10個化學成分得到明確鑒定，另外推導(dǎo)了15個化合物的結(jié)構(gòu)，其中有7個為未見文獻報道的化合物。 4.建立了HPLP—UV法測定84個批次原植物和商品中3種特征性苯乙醇苷類成分阿克苷(acteoside，1)、紫莖女貞苷A(ligupurpuroside A，2)、紫莖女貞

7、苷B(ligupurpuroside B，3)的含量。結(jié)合指紋圖譜的研究結(jié)果將各樣品之間含量的差異與品種、產(chǎn)地、炮制方法及藥用部位之間的關(guān)系進行探討。 5.對包括粗壯女貞、女貞、麗葉女貞在內(nèi)的7個批次的樣品揮發(fā)油進行GC—MS研究，共鑒定了65個化合物的結(jié)構(gòu)。 6.利用硅膠吸附柱色譜、ODS柱色譜、SephadexLH—20等色譜分離手段從紫草科苦丁茶厚殼樹(Ehretia thyrsiflora)葉中分離得到35個單體

8、化合物，通過理化性質(zhì)分析和波譜解析鑒定了其中的27個，分別為槲皮素3—O-α—D—阿拉伯糖苷(quercetin—3—O-α—D—arabinoside，1)，山奈酚3—O-α—D—阿拉伯糖苷(kaempferol—3—O-α—D—arabinoside，2)，異槲皮素(quercetin—3—O-β—D—glucopyranoside，3)，金絲桃苷(hyperoside，4)，山奈酚3—O-β—D—半乳糖苷(kampferol—3—

9、O-β—D—galactopyranoside，5)，山奈酚3—O-β—D—葡萄糖苷(kampferol—3—O-β—D—glucopyranoside，6)，kaempferol—3—O—arabinosylgalactoside(7)，quercetin—3—O—arabinosylgalactoside(8)，槲皮素(quercetin，9)，山奈酚(kampferol，10)，阿魏酸(trans—ferulic acid，11)

10、，咖啡酸(caffeic acid，12)，對羥基苯甲酸(p—hydroxy benzoic acid，13)，迷迭香酸甲酯(methyl rosmarinate，14)，迷迭香酸(rosemarinic acid，15)，紫草酸B(lithospermic acid B，16)，丹參素(danshensu，17)，肉桂酸(cinnamic acid，18)，icarisideE5(19)，咖啡酸乙酯[(E)—ethyl caffeat

11、e，20]，鄰苯二甲酸二(2—乙基己)酯[di(2—ethylhexyl)phthalate，21]，2—甲氧基苯甲酸辛酯(2—methoxyl benzoic acid octyl ester，22)，鄰苯二甲酸十八烷基酯[di(octadecyl)phthalate，23]，β—谷甾醇(β—Sitosterol，24)，胡蘿卜苷(daucosterol，25)，尿囊素(allantoin，26)，1—十四烯酸甘油酯(tetradec

12、enoic acid，2，3—dihydroxypropyl ester，27)。所有化合物均為首次從該植物中分離得到，化合物1—13，16—18，20-23，26，27為首次從該屬植物中分離得到。 7.首次建立了HPLC法測定厚殼樹葉中包括5種黃酮苷和2種酚酸在內(nèi)的7種成分含量的方法，該方法簡便快捷，分離度和重現(xiàn)性均較好，同時將該方法應(yīng)用于紫草科7個批次樣品含量測定。為藥用植物資源利用提供依據(jù)。 8.對厚殼樹化學成分研