苦丁茶冬青苦丁茶多酚類物質(zhì)的生物活性及分離純化研究.pdf

1、苦丁茶是我國(guó)南部和東部地區(qū)人民飲用的一種代用茶,苦丁冬青苦丁茶是其3個(gè)主要品種之一。其所含各種成分的藥理作用及保健功能日益引起人們的關(guān)注?？喽〔瓒噘Y源豐富,但因其口感苦澀,很難作為日常飲品推廣,若能將苦丁茶冬青苦丁茶進(jìn)行深加工,提取有效活性成分,增加產(chǎn)品附加值,具有十分重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。
　　 本研究評(píng)價(jià)了苦丁茶冬青苦丁茶粗提物的體內(nèi)、體外抗氧化,抗肥胖以及抗腫瘤活性,利用大孔樹脂對(duì)苦丁茶冬青苦丁茶多酚類物質(zhì)進(jìn)行初步分

2、離純化并對(duì)初步純化多酚組成進(jìn)行HPLC及LC-MS檢測(cè)；結(jié)果如下:
　　 采用DPPH法、ABTS法和還原力的測(cè)定的測(cè)定等3種方法測(cè)定苦丁茶冬青苦丁茶粗提物的體外抗氧化活性,結(jié)果表明苦丁茶冬青苦丁茶多酚具有較強(qiáng)的體外抗氧化功能。運(yùn)用動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)研究分析了苦丁茶冬青苦丁茶多酚的體內(nèi)抗氧化活性。結(jié)果表明:應(yīng)用低劑量處理可克服D-半乳糖誘導(dǎo)的氧化損傷；應(yīng)用高劑量處理可以顯著地抑制肝臟和血清中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物(MDA)的生成,顯著地提高肝

3、臟和血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、過氧化氫酶(CAT)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性以及非酶性抗氧化能力(TAOC),且這種變化與苦丁茶冬青苦丁茶多酚呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系。
　　 通過評(píng)價(jià)對(duì)三種消化酶-α-淀粉酶,胰脂肪酶以及α-葡萄糖苷酶的活性抑制作用,初步分析了苦丁茶冬青苦丁茶多酚的抗肥胖功能。結(jié)果表明:苦丁茶冬青苦丁茶多酚對(duì)α-淀粉酶活性有較強(qiáng)的抑制作用(IC50=18μg/mL)。對(duì)胰脂肪酶的抑制作用次之

4、,對(duì)葡萄糖苷酶的活性相對(duì)較弱。
　　 采用MTT法測(cè)定了苦丁茶冬青苦丁茶對(duì)人肝癌細(xì)胞株Hep-G2細(xì)胞以及胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞的體外增殖的影響,通過比較不同作用濃度下苦丁茶多酚對(duì)于癌細(xì)胞的抑瘤率,初步探討其對(duì)胃癌及肝癌細(xì)胞的作用效果。結(jié)果表明:苦丁茶冬青苦丁茶的抑瘤率與其濃度間均存在劑量依賴關(guān)系,在相同時(shí)間條件下,隨濃度的升高,抑瘤率逐漸增強(qiáng)。750μg/mL苦丁茶多酚對(duì)Hep-G2抑瘤率達(dá)80％；1 mg/mL苦丁茶多

5、酚對(duì)BGC-823細(xì)胞抑瘤率達(dá)88.94％
　　 應(yīng)用大孔樹脂對(duì)苦丁茶冬青苦丁茶多酚類物質(zhì)進(jìn)行初步分離純化。從7種常用大孔樹脂中篩選出HP20型樹脂進(jìn)行分離純化實(shí)驗(yàn)。從Langmuir吸附曲線可以看出理論最大吸附量Qm為114.94mg/g,吸附平衡KL參數(shù)為1.359mL/mg；Freundlich媳婦曲線中KF為71.5mg/g,1/n為0.2173說明HP-20大孔樹脂對(duì)苦丁茶多酚有很好的吸附作用。上樣液pH值為4時(shí)可保持