X線誘導結直腸癌SW480細胞上皮間質轉化及其信號傳導通路的相關研究.pdf

1、目的：
　　1.檢測X線照射對結直腸癌SW480細胞上皮間質轉化的影響。
　　2.檢測X線照射后結直腸癌SW480細胞可能的上皮間質轉化相關信號傳導通路中間關鍵分子的變化，探討X線照射誘導結直腸癌細胞發(fā)生上皮間質轉化可能的信號傳導通路。
　　方法：
　　1.將人結直腸癌SW480細胞分為5組，分別用0、2、4、6、8Gy劑量的X線照射后培養(yǎng)48h。
　　2.應用Western blot檢測X線照射后各組的間

2、質化指標Vimentin的蛋白表達情況。
　　3.應用QRT-PCR和Western blot分別檢測人類結直腸癌SW480細胞的K-ras和Smad3的mRNA和蛋白水平變化情況，分析人結直腸癌細胞SW480經 X線照射引起發(fā)生上皮間質轉化的可能信號傳導通路。
　　結果：
　　1.經過X線照射后，應用Western blot檢測Vimentin蛋白水平，發(fā)現(xiàn)與對照0Gy劑量組相比，所有實驗組的表達均升高。
　　

3、2.QRT-PCR檢測K-ras的mRNA水平，發(fā)現(xiàn)與對照0Gy劑量組相比，2Gy劑量組無明顯變化（P>0.05），而4、6、8Gy劑量組均明顯降低（P<0.05）。但4、6、8Gy劑量組之間無明顯統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　3.QRT-PCR檢測Smad3的mRNA水平，發(fā)現(xiàn)與對照組0Gy相比，X線照射組2、4、6、8Gy劑量組的Smad3的mRNA表達水平均明顯升高（P<0.05）。但是各照射組之間的差異無統(tǒng)計學意義（P

4、>0.05）。
　　4.應用Western blot檢測K-ras蛋白水平，和對照0Gy劑量組相比，各實驗組2、4、6、8Gy各劑量組K-ras蛋白的表達均明顯下降（P<0.05）。
　　5.應用Western blot檢測Smad3蛋白水平，和對照0Gy劑量組相比，除2Gy劑量組無明顯變化外（P>0.05），其余4、6、8Gy劑量組Smad3蛋白表達水平均明顯升高（P<0.05）。
　　結論：
　　1.X線照射