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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1.檢測(cè)X線照射對(duì)結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響。
2.檢測(cè)X線照射后結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞可能的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)通路中間關(guān)鍵分子的變化,探討X線照射誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化可能的信號(hào)傳導(dǎo)通路。
方法:
1.將人結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞分為5組,分別用0、2、4、6、8Gy劑量的X線照射后培養(yǎng)48h。
2.應(yīng)用Western blot檢測(cè)X線照射后各組的間
2、質(zhì)化指標(biāo)Vimentin的蛋白表達(dá)情況。
3.應(yīng)用QRT-PCR和Western blot分別檢測(cè)人類結(jié)直腸癌SW480細(xì)胞的K-ras和Smad3的mRNA和蛋白水平變化情況,分析人結(jié)直腸癌細(xì)胞SW480經(jīng) X線照射引起發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的可能信號(hào)傳導(dǎo)通路。
結(jié)果:
1.經(jīng)過(guò)X線照射后,應(yīng)用Western blot檢測(cè)Vimentin蛋白水平,發(fā)現(xiàn)與對(duì)照0Gy劑量組相比,所有實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)均升高。
3、2.QRT-PCR檢測(cè)K-ras的mRNA水平,發(fā)現(xiàn)與對(duì)照0Gy劑量組相比,2Gy劑量組無(wú)明顯變化(P>0.05),而4、6、8Gy劑量組均明顯降低(P<0.05)。但4、6、8Gy劑量組之間無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
3.QRT-PCR檢測(cè)Smad3的mRNA水平,發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組0Gy相比,X線照射組2、4、6、8Gy劑量組的Smad3的mRNA表達(dá)水平均明顯升高(P<0.05)。但是各照射組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
4、>0.05)。
4.應(yīng)用Western blot檢測(cè)K-ras蛋白水平,和對(duì)照0Gy劑量組相比,各實(shí)驗(yàn)組2、4、6、8Gy各劑量組K-ras蛋白的表達(dá)均明顯下降(P<0.05)。
5.應(yīng)用Western blot檢測(cè)Smad3蛋白水平,和對(duì)照0Gy劑量組相比,除2Gy劑量組無(wú)明顯變化外(P>0.05),其余4、6、8Gy劑量組Smad3蛋白表達(dá)水平均明顯升高(P<0.05)。
結(jié)論:
1.X線照射
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