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文檔簡介
1、目的:
1.檢測X線照射對結直腸癌SW480細胞上皮間質轉化的影響。
2.檢測X線照射后結直腸癌SW480細胞可能的上皮間質轉化相關信號傳導通路中間關鍵分子的變化,探討X線照射誘導結直腸癌細胞發(fā)生上皮間質轉化可能的信號傳導通路。
方法:
1.將人結直腸癌SW480細胞分為5組,分別用0、2、4、6、8Gy劑量的X線照射后培養(yǎng)48h。
2.應用Western blot檢測X線照射后各組的間
2、質化指標Vimentin的蛋白表達情況。
3.應用QRT-PCR和Western blot分別檢測人類結直腸癌SW480細胞的K-ras和Smad3的mRNA和蛋白水平變化情況,分析人結直腸癌細胞SW480經 X線照射引起發(fā)生上皮間質轉化的可能信號傳導通路。
結果:
1.經過X線照射后,應用Western blot檢測Vimentin蛋白水平,發(fā)現(xiàn)與對照0Gy劑量組相比,所有實驗組的表達均升高。
3、2.QRT-PCR檢測K-ras的mRNA水平,發(fā)現(xiàn)與對照0Gy劑量組相比,2Gy劑量組無明顯變化(P>0.05),而4、6、8Gy劑量組均明顯降低(P<0.05)。但4、6、8Gy劑量組之間無明顯統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
3.QRT-PCR檢測Smad3的mRNA水平,發(fā)現(xiàn)與對照組0Gy相比,X線照射組2、4、6、8Gy劑量組的Smad3的mRNA表達水平均明顯升高(P<0.05)。但是各照射組之間的差異無統(tǒng)計學意義(P
4、>0.05)。
4.應用Western blot檢測K-ras蛋白水平,和對照0Gy劑量組相比,各實驗組2、4、6、8Gy各劑量組K-ras蛋白的表達均明顯下降(P<0.05)。
5.應用Western blot檢測Smad3蛋白水平,和對照0Gy劑量組相比,除2Gy劑量組無明顯變化外(P>0.05),其余4、6、8Gy劑量組Smad3蛋白表達水平均明顯升高(P<0.05)。
結論:
1.X線照射
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