卡托普利逆轉SHR心、腦、腎微血管稀少及其對心、腦血管內皮Bax、Bcl-2和腦內VEGF、nNOS、BDNF表達的影響.pdf

1、目的：探討卡托普利降壓治療對自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneouslyhypertensiverat，SHR)心、腦、腎微血管(毛細血管)減少是否具有逆轉作用，并對其機制進行初步探討。 方法：用單寧酸-氯化鐵組織化學媒染毛細血管的方法，分別灌注成年(5月齡)對照組自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、經(jīng)卡托普利治療三個月的同月齡SHR組及同月齡正常血壓對照組大鼠(Wistar-KYOTO，WKY)，共3組，每組10只。分別取其心、腦、腎

2、經(jīng)冰凍切片，組織化學染色顯示毛細血管。另選上述大鼠3組，各組14只，常規(guī)灌注固定，行免疫組織化學染色(PV二步法)顯示心、腦微血管內皮細胞漿中凋亡調節(jié)基因Bax、Bcl-2的表達水平。最后對上述2種染色結果分別進行光鏡觀察、攝像，采用計算機圖像分析系統(tǒng)進行血管密度及凋亡調節(jié)基因表達的半定量分析，統(tǒng)計學處理采用單因素方差分析，組間比較采用t檢驗。 結果：1微血管密度變化情況：(1)與對照組WKY組相比，成年(5月齡)SHR對照組腦

3、內、腎皮質、腎髓質、心肌微血管的分布密度均明顯減少，單位面積內微血管的面積密度分別為：大腦皮質(5.85±0.69)％VS(4.15±1.12)％，腎皮質(23.24±1.96)％VS(19.25±2.11)％，腎髓質(19.23±1.57)％VS(l5.32±0.94)％，心肌(22.56±2.12)％VS(19.85±1.98)％，腎小球面積密度(19572±213μm2)VS(16328±157μm2)，各組間比較均為P＜0.01

4、；(2)與成年SHR對照組相比，卡托普利治療組SHR相應部位微血管分布的密度均明顯增加，分別為大腦皮質(4.15±1.12)％VS(5.64±0.72)％，腎皮質(19.25±2.11)％VS(21.24±2.02)％，腎髓質(15.32±0.94)％VS(20.15±1.32)％，心肌(19.85±1.98)％VS(21.65±1.97)％，腎小球面積密度(16328±157μm2)VS(19225±203μm2)，組間比較均為P＜0

5、.01；(3)同齡正常血壓大鼠(WKY)與卡托普利治療組SHR組比較各器官相應部位微血管密度分布均無明顯變化，組間比較均為P＞0.05。 2凋亡調節(jié)基因Bax、bcl-2表達結果：(1)對照組成年SHR心、腦組織微血管內皮細胞Bax表達程度明顯強于治療組成年SHR和對照組WKY，分別為：腦內(148.4±3.21)VS(127.4±7.56)VS(76.32±9.12)，心內(87.59±9.32)VS(64.89±3.47)V

6、S(51.45±4.78)，組間比較P＜0.01；(2)對照組SHR心、腦微血管內皮bcl-2表達程度高于WKY組，但低于治療組，分別為：心內(75.46±5.67)VS(101.5±16.06)VS(53.28±5.05)；腦內(121.53±4.37)VS(134.75±9.88)VS(98.31±11.79)，組間比較P＜0.01；(3)各組心內Bcl-2/Bax比值分別為：SHR對照組0.87±0.46，SHR治療組1.56±0

7、.97，WKY正常組1.07±0.73；腦內Bcl-2/Bax比值分別為：SHR對照組0.83±0.61、SHR治療組1.06±0.92、WKY正常組1.29±1.06，各組間比較P＜0.01； 結論：1本實驗通過對三組大鼠多個器官毛細血管密度的觀察，進一步證實成年高血壓大鼠存在著較普遍的微血管稀少現(xiàn)象。2通過卡托普利早期治療自發(fā)性高血壓大鼠，證明卡托普利在降壓的同時具有逆轉SHR微血管稀少的作用。3卡托普利逆轉微血管稀少的作用

8、是通過血管內皮細胞漿中凋亡調節(jié)基因Bax、Bcl-2表達水平改變而介導的，即對照組SHR心、腦微血管內皮細胞中抑凋亡基因bcl-2的表達降低(相對正常對照組WKY輕度增高)，而促凋亡基因Bax表達水平增高(明顯高于正常對照組WKY)，二者比值降低，使內皮細胞凋亡增多；而降壓治療后上述變化得到了逆轉。 目的：通過卡托普利治療SHR，觀察SHR降壓治療前、后腦組織nNOS、VEGF、BDNF表達變化，探討高血壓早期是否存在腦損害及卡

9、托普利降壓治療對腦損害是否具有保護作用。 方法：隨機選取2月齡的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)28只、不分雌雄、隨機分為兩組，即高血壓對照組、高血壓治療組；另選正常血壓的日本京都Wistar大鼠(WKY)14只，作為正常血壓對照組。治療組SHR治療三個月后(其它兩組大鼠飼養(yǎng)相同時問、環(huán)境)，應用免疫組化PV兩步法，分別觀察三組大鼠腦組織nNOS、VEGF、BDNF表達情況，并利用計算機圖像分析系統(tǒng)進行半定量分析，所得數(shù)據(jù)進行單因素方

10、差分析，組間比較采用t檢驗。 結果：1卡托普利治療對SHR降壓效果明顯，治療前與治療后血壓比較(P＜0.01=；2nNOS陽性細胞分布于大腦皮層、視上核、室旁核、孤束核、下丘腦、海馬、紋狀體等部位。3VEGF陽性細胞分布于大腦皮質、紋狀體、室管膜以及脈絡叢等部位。4BDNF陽性細胞分布于海馬、大腦皮層、紋狀體、胼胝體等處。5治療組SHR腦內nNOS、VEGF、BDNF表達陽性細胞數(shù)目及表達強度，均比未經(jīng)治療的對照組SHR下降(P

11、＜0.01)，治療組SHR和正常對照組WKY兩組比較，無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。 結論：隨著血壓的升高，成年SHR(對照組)腦內nNOS、VEGF、BDNF蛋白表達水平上調，說明三種因子都與高血壓的發(fā)生發(fā)展有關，并且在高血壓早期就存在對腦的不利影響(nNOS表達增強對神經(jīng)元具有毒性作用，而BDNF與VEGF表達增強據(jù)認為是對腦損傷的代償反應)。經(jīng)卡托普利降壓治療后腦內三種蛋白的表達均下調，接近正常，說明卡托普利降壓治療對靶器