大腸桿菌腦微血管內(nèi)皮細胞侵襲蛋白yijP的表達純化和功能分析.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文大腸桿菌腦微血管內(nèi)皮細胞侵襲蛋白yijP的表達純化和功能分析姓名：王淳申請學位級別：碩士專業(yè)：細胞生物學指導教師：陳譽華20030401②纓臆計數(shù)法分析yijP蛋叁辯HBMEC的生長摔裁搏耀；③光學顯微鏡下觀察libMEC的形態(tài)變化；④辯j罱熒光顯徽轆觀察細胞核的改變；⑥流式綱胞儀棱測販二倍體峰；⑥璩疆糖凝菝毫泳觀察DNAladder；@Westernblotting方法檢濺easpase3的活往冀段；⑧采耀t～

2、檢驗進行統(tǒng)計學分柝。講究絡票16Histag—yijP簧鑫賡靜表這與撬純：大激擴增M15(pREP4、pQE一鼬P)黻體細胞。將IPTG誘導后05h靜瓣胞裘解秘進行SDS—PAGE分斬，在41KD懿爵覓一條遨漸增嵩的蛋巍條帶，這與推輯的Histag—y4jP融和蓬自分子爨壤簿。蛋鑫經(jīng)過Ni一1VrAAgarose黎糖屢輯釋：簿折疊，SD$一PAGE分析表襞寨翔屢析箍純專復性蒜籀豢盤條帶位鬟冬細胞裂鰓褥巾的靛置一致。2yijP爨自質(zhì)功熊分

3、橫：◇MTr實驗檢測結暴發(fā)瑰yijP蛋自搿葶l起萌顯瓣細臆增楚蘩制佟蔫，yijP實驗縫篙對照維存在統(tǒng)詩學意義(PO。05)，并存在濃囊依羧譙。②傳統(tǒng)方法傲緶胞德長曲線，連續(xù)觀察發(fā)現(xiàn)：從給藥麝的第16h秤始，嫡P緩和對照組出現(xiàn)差異(P《O01)，44h后yijP組細胞幾乎全部死亡。說驥嫡P蛋巍對HBMEC的毒牲作用存在對閥依耬毀。@壯∥藤y妒蟹宣島HBMEC孵育16h后，耀差顯徽髓穰熒光顯微鏡下細胞表現(xiàn)如掰亡特征。④澈式繃胞儀可在正常二倍