非酒精性脂肪性肝病患者腸道菌群變化及其與禁食誘導(dǎo)脂肪因子、胰島素抵抗的相關(guān)性研究.pdf

1、非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是指除乙醇和其他明確的肝損害因素所致的，以彌漫性肝細(xì)胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣鞯呐R床病理綜合征。根據(jù)肝內(nèi)脂肪變、炎癥和纖維化的程度，將NAFLD分為單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝硬化。
　　NAFLD的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確，目前研究認(rèn)為NAFLD的發(fā)病與胰島素抵抗、脂代謝異常、脂質(zhì)過氧化等密切相關(guān)。而隨著研究的不斷深入，有學(xué)者

2、認(rèn)為腸道菌群的改變可以通過直接調(diào)控機(jī)體脂肪合成與儲(chǔ)存相關(guān)基因的表達(dá)，影響能量吸收和儲(chǔ)存，促進(jìn)肥胖形成和胰島素抵抗等機(jī)制影響能量代謝[1]，參與NAFLD的發(fā)生和發(fā)展。
　　禁食誘導(dǎo)脂肪因子(fasting-induced adipose factor，F(xiàn)iaf)基因主要負(fù)責(zé)編碼脂蛋白脂肪酶(lipoprteinlipase，LPL)抑制因子，LPL可以水解在脂蛋白顆粒的甘油三酯，促進(jìn)脂質(zhì)沉積。Fiaf正是通過抑制LPL，從而抑制甘

3、油三酯循環(huán)。有研究表明在動(dòng)物體內(nèi)，F(xiàn)iaf可被腸道菌群調(diào)控，腸桿菌的增加可以抑制Fiaf的表達(dá)，使得LPL表達(dá)增多，導(dǎo)致脂質(zhì)沉積，但其具體機(jī)制需進(jìn)一步的研究[2,23]。也有研究表明2型糖尿病患者外周血中Fiaf減少，且與胰島素抵抗相關(guān)[24]。因此，我們就NASH患者腸道菌群的變化，及其是否與Fiaf因子、胰島素抵抗有關(guān)進(jìn)行初步研究。
　　目的:檢測(cè)NAFLD患者腸道菌群的變化，測(cè)定血漿Fiaf因子的水平，分析腸道菌群與Fiaf

4、因子、胰島素抵抗的相關(guān)性，探討腸道菌群在非NAFLD發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法:本研究共收集在我院門診和體檢部經(jīng)臨床、實(shí)驗(yàn)室、B超確診為非酒精性脂肪型肝病患者30例（病例組），在我院門診體檢結(jié)果為健康并且愿意接受實(shí)驗(yàn)的成年人30例（對(duì)照組）。NAFLD診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組制定的非酒精性脂肪性肝病診療指南[3]。所有研究對(duì)象均除外近期使用腸道微生態(tài)制劑、酸奶、使用抗生素等可能影響腸道菌

5、群的制劑。常規(guī)測(cè)量?jī)山M的身高、體重、腹圍，計(jì)算BMI值。選擇腸道菌群中5種具有代表性的細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)，分別計(jì)數(shù)病例組和對(duì)照組腸道菌群中這5種細(xì)菌的數(shù)量，用以評(píng)價(jià)腸道菌群的變化狀況。收集所有研究對(duì)象清晨空腹抽取的靜脈血血清，采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、空腹血糖(FPG)以及空腹胰島素(FINS)水平。使用平衡穩(wěn)態(tài)模型的評(píng)價(jià)法，計(jì)算胰島

6、素抵抗指數(shù)(homeostatic model assessment-insulin resistance，HOMA-IR)，評(píng)估胰島素抵抗程度。通過RT-PCR方法檢測(cè)兩組血漿中Fiaf的mRNA的表達(dá)。根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，分析腸道菌群數(shù)量、Fiaf的含量、HOMA-IR的相關(guān)性。
　　結(jié)果:1兩組腸道菌群數(shù)量比較:與對(duì)照組相比，NAFLD組變形桿菌和腸球菌數(shù)量明顯增加(9.20±0.20vs8.73±0.41，7.70±0.55vs

7、7.18±0.36，P＜0.05)，雙歧桿菌、擬桿菌、乳桿菌數(shù)量明顯減少(8.89±0.28vs9.16±0.22,7.29±0.36 vs7.94±0.15,9.21±0.36 vs9.76±0.22, P＜0.05)。2兩組年齡、性別、BMI、腹圍比較:兩組在年齡、性別上差異無意義（P＞0.05），相比正常對(duì)照組，NAFLD組研究對(duì)象的腹圍、BMI均明顯升高(90.5±8.86vs81.67±8.89,27.42±3.14vs24.

8、22±2.37,P＜0.05)。3兩組血清學(xué)指標(biāo)比較:與對(duì)照組相比，病例組ALT(37.75±29.93 vs11.17±1.72)、AST(27.96±18.99 vs10.83±1.47)、CHOL(5.17±0.80 vs4.44±0.54)、TG(2.16±1.04 vs0.94±0.41)水平明顯升高，均P＜0.05;病例組Fiaf水平明顯降低（1.21±0.05 vs1.26±0.03，P＜0.05），病例組HOMA-IR明

9、顯升高（4.91±1.21vs2.86±0.51，P＜0.05）。兩組LDL差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4相關(guān)性分析:5種腸道菌群中只有變形桿菌數(shù)量與血清FiafmRNA表達(dá)水平呈顯著性負(fù)相關(guān)(r=-0.734，P＜0.01)，血漿FiafmRNA表達(dá)水平和HOMA-IR呈顯著性負(fù)相關(guān)（r=-0.819，P＜0.01），變形桿菌數(shù)量和HOMA-IR呈正相關(guān)（r=0.614，P＜0.01）。
　　結(jié)論:1 NAFLD患者存在腸道菌群的失調(diào)，表