肝癌差減雜交文庫(kù)的構(gòu)建及鈣磷脂結(jié)合蛋白Ⅱ在肝癌中的表達(dá).pdf

1、南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文肝癌差減雜交文庫(kù)的構(gòu)建及鈣磷脂結(jié)合蛋白Ⅱ在肝癌中的表達(dá)姓名：朱曉靜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病理學(xué)指導(dǎo)教師：馮振卿20060420南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文進(jìn)一步觀察鈣磷脂結(jié)合蛋白I I 在肝癌組織中的表達(dá)，旨在為肝癌的分子發(fā)病機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。研究方法：1 ．應(yīng)用s s H 構(gòu)建正、反向差減雜交文庫(kù)。2 ．應(yīng)用c D N A 芯片鑒定差減克隆。3 ．經(jīng)鑒定存在表達(dá)差異的差減克隆，以載體序列為測(cè)序引物，進(jìn)行測(cè)序。4

2、 ．測(cè)序結(jié)果以B L A S T n 軟件和G e n B a l l k 公共數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)。5 ．實(shí)時(shí)熒光定量P C R 檢測(cè)a n n e x i n I I 在肝癌組織和非腫瘤肝組織中的m R N A 相對(duì)含量。6 ．免疫組化研究a n n e x i nI I 在肝癌組織和正常肝組織中表達(dá)。研究結(jié)果：1 ．應(yīng)用s s H 成功構(gòu)建了分別含5 7 6 個(gè)和7 3 8 個(gè)克隆的正、反向差減雜交文庫(kù)。2 ．經(jīng)c D N A 芯片鑒定

3、共獲得差異表達(dá)克隆4 9 5 個(gè)，其中肝癌組織高表達(dá)克隆2 7 4 個(gè)，2 ．3 倍、3 ．4 倍和4 倍以上高表達(dá)克隆分別為2 3 0 、3 5 個(gè)和9 個(gè)。非腫瘤肝組織中高表達(dá)克隆2 2 1 個(gè)，2 ．3 倍、3 ．4 倍和4倍以上高表達(dá)克隆分別為1 2 5 、2 2 個(gè)和7 4 個(gè)。3 ．經(jīng)c D N A 芯片鑒定存在差異的克隆，測(cè)序后以B L A s T n 軟件與G e I l B a n k 公共數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，結(jié)果顯示在肝