uPAR在肝癌中的表達(dá)及其與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系研究.pdf

1、目的： 1．研究尿激酶型纖溶酶原激活劑受體（urokinase—type plasminogen activator receptor，uPAR）在肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）組織、癌旁組織及正常肝組織中的表達(dá)，結(jié)合HCC的臨床病理因素，探討uPAR與HCC臨床病理因素的關(guān)系。 2．研究uPAR在兩種不同轉(zhuǎn)移能力的HCC細(xì)胞系Hep—3B（弱轉(zhuǎn)移能力）和SMMC—7721（強(qiáng)轉(zhuǎn)移能

2、力）中的表達(dá)，結(jié)合兩種HCC細(xì)胞系體外侵襲轉(zhuǎn)移能力的差別，探討uPAR與HCC細(xì)胞系的體外侵襲能力的關(guān)系。 3．研究HCC細(xì)胞系SMMC—7721中uPAR+細(xì)胞和uPAR—細(xì)胞的體外及體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移能力的差別，進(jìn)一步探討uPAR的表達(dá)對(duì)HCC細(xì)胞的體內(nèi)體外侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。 方法： 1．利用免疫組化方法檢測(cè)50例HCC及癌旁組織和10例正常肝組織中uPAR的表達(dá)，分析其與HCC的臨床病理分級(jí)、包膜侵犯、門(mén)脈癌栓

3、、腫瘤大小等臨床病理因素的關(guān)系。 2．利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)HCC細(xì)胞系Hep—3B和SMMC—7721中uPAR的表達(dá)，通過(guò)Boyden小室侵襲實(shí)驗(yàn)比較兩種細(xì)胞系體外侵襲能力的差別。 3．利用流式細(xì)胞分選技術(shù)從SMMC—7721中分選出uPAR陽(yáng)性細(xì)胞（uPAR+）及陰性細(xì)胞（uPAR—），再通過(guò)Boyden小室侵襲實(shí)驗(yàn)比較uPAR+組和uPAR—組體外侵襲能力的差別，并通過(guò)裸鼠體內(nèi)成瘤及轉(zhuǎn)移模型來(lái)比較uPAR+組和uP

4、AR—組的體內(nèi)侵襲轉(zhuǎn)移能力差別。 結(jié)果： 1．uPAR在HCC中呈高表達(dá)，而在相應(yīng)的癌旁及正常肝組織的表達(dá)則明顯減弱。uPAR的表達(dá)和包膜侵犯、門(mén)脈癌栓密切相關(guān)（P<0．01），并臨床病理分級(jí)相關(guān)，隨著HCC分化的降低，uPAR的表達(dá)呈逐步增高的趨勢(shì)；而與腫瘤大小、肝硬變程度、性別、肝功能、AFP、HBsAg等因素沒(méi)有明顯相關(guān)性（P>0．05）。 2．通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，uPAR在HCC細(xì)胞系SMMC—77

5、21中的表達(dá)顯著高于Hep—3B中的表達(dá)（P<0．01），表達(dá)率分別為45．5%和0．05%。體外Boyden小室侵襲實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，SMMC—7721的體外侵襲能力明顯強(qiáng)于Hep—3B（P<0．01）。 3．從肝癌細(xì)胞系SMMC—7721中分選出來(lái)的uPAR+組較uPAR一組在Boyden小室侵襲實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出更強(qiáng)的體外侵襲能力（P<0．01）；通過(guò)裸鼠體內(nèi)成瘤及轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)，uPAR+組較uPAR一組有著更強(qiáng)的體內(nèi)成瘤和侵襲轉(zhuǎn)移能力（P

6、<0．01）。 結(jié)論： 1． uPAR在HCC中的表達(dá)顯著高于相應(yīng)的癌旁及正常肝組織中的表達(dá)，提示uPAR的表達(dá)是HCC的重要特征；uPAR的表達(dá)和臨床病理分級(jí)、包膜侵犯、門(mén)脈癌栓密切相關(guān)，而與其他因素?zé)o關(guān)，提示uPAR的表達(dá)與HCC的惡性生物學(xué)行為密切相關(guān)，uPAR可以作為HCC預(yù)后的有效指標(biāo)。 2．uPAR在具有強(qiáng)轉(zhuǎn)移能力的HCC細(xì)胞系SMMC—7721中的表達(dá)顯著高于弱轉(zhuǎn)移能力的HCC細(xì)胞系Hep—3B中的

7、表達(dá)，提示uPAR的表達(dá)是強(qiáng)轉(zhuǎn)移能力的HCC細(xì)胞系的重要特征；體外侵襲實(shí)驗(yàn)證實(shí)SMMC—7721較Hep—3B有著更強(qiáng)的體外侵襲能力，初步說(shuō)明uPAR的表達(dá)與HCC細(xì)胞株的體外侵襲能力有關(guān)。 3．從強(qiáng)轉(zhuǎn)移能力的HCC細(xì)胞系SMMC—7721中分選出來(lái)的uPAR+組較uPAR一組在Boyden小室侵襲實(shí)驗(yàn)中也表現(xiàn)出更強(qiáng)的體外侵襲能力，進(jìn)一步說(shuō)明了uPAR的表達(dá)賦予了HCC細(xì)胞更強(qiáng)的體外侵襲能力；裸鼠體內(nèi)成瘤及轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)uPAR+