白細胞介素6及其受體在子宮內膜異位癥中表達的研究.pdf

1、自然狀態(tài)下,IL-6R以膜結合受體(membrane binding interleukin 6 receptor,mlL-6R)和可溶性受體(soluble interleukin 6 receptor,sIL-6R)這兩種形式存在.與IL-6廣泛的生物學活性相一致,mIL-6R廣泛表達于多種組織細胞,包括EB病毒轉化的B細胞、骨髓瘤細胞、髓樣白血病細胞、肝細胞、活化的B細胞和靜息的T細胞,人外周血單核細胞等.而sIL-6R存在于人的

2、尿液、血液以及其他體液中.在某些疾病狀態(tài)下,機體產生sIL-6R的水平顯著升高.目前認為sIL-6R的產生機制有兩種:一是細胞膜上的mIL-6R經蛋白酶水解脫落形成,二是體液中存在著編碼sIL-6R的mRNA. IL-6的多種生物學活性主要是通過其與相應的mIL-6R結合所介導的,而sIL-6R卻具有獨特的生物學意義.大多數細胞因子的可溶性受體,如IL-2R、TNF-aR等,可與膜受體競爭結合配體,作為配體的拮抗劑發(fā)揮生理與治療效應.然

3、而,sIL-6R與配體IL-6結合所形成的復合物仍具有生物學功能,可進一步與IL-6受體的gp130結合并繼續(xù)發(fā)揮IL-6的生物學作用.由于表達gp130的組織細胞非常廣泛,而體液中sIL-6R能介導IL-6的生物學作用,這就擴大了IL-6作用的組織細胞譜,從而更廣泛地發(fā)揮IL-6的多功能生物學作用.sIL-6R的這種介導增強IL-6的生物學意義,在機體的免疫調節(jié)中可能具有重要意義. IL-6R及sIL-6R在Ems中意義的研究

4、很少,僅有的資料顯示, Ems患者可能通過下調子宮內膜IL-6R的表達,從而抵制了IL-6對子宮內膜間質細胞的生長抑制作用, IL-6的這種反應性失調參與了Ems的發(fā)病機制.sIL-6R的效應與IL-6相似,可抑制分泌期子宮內膜的生長,其在Ems中的表達,文獻報道極少且不一致.有作者報道Ems患者腹腔液和血中sIL-6R升高,但也有報道IL-6升高而sIL-6R下降,且與疾病的嚴重程度相關,還有作者報道沒有改變. 目的

5、通過檢測Ems患者腹腔液中活化巨噬細胞及其表面mIL-6R的表達,以及Ems患者腹腔液和血液中IL-6和sIL-6R的表達, 探討IL-6及IL-6R在Ems的發(fā)病機制中的意義,深入研究IL-6在Ems發(fā)病機制中的作用機理,期望能為Ems的診治提供新的理論依據. 材料與方法 1.研究對象:在浙大醫(yī)學院附屬婦產科醫(yī)院經腹腔鏡或組織學檢查確診為Ems的住院病人47例為Ems組,根據r-AFS分期分為即A組(I～II期:19例

6、)和B組(III～Ⅳ期:28例).選擇同期經腹腔鏡或組織學檢查確診為良性卵巢囊腫或先天性子宮畸形的患者22例為對照組. 2.樣本處理:手術前1天抽取外周靜脈血2ml,取上清血漿置.70-℃冰箱保存待測.腹腔鏡直視下抽取未污染腹腔液,離心后取上清液置.70-℃冰箱保存待測;沉淀細胞分離后提取巨噬細胞,制成巨噬細胞單細胞懸液待測. 3.實驗方法: 流式細胞法:CD14-FITC和CD126-PE分別標記活化的巨噬細胞

7、和mIL-6R,流式細胞法檢測CD14<'+>、CD126<'+>及CD14<'+>/CD126<'+>的表達.ELISA:檢測腹腔液和血漿中IL6和slL-6R含量. 4.統(tǒng)計學分析:腹腔液中IL6的含量差異大,非正態(tài)分布,取對數值處理后呈正態(tài)分布.所有數據以X±S表示,并通過方差齊性檢驗(p>0.05).3組間比較采用ANOVA法,兩兩比較采用Student-Newman-Keuls法.所有數據采用SPSSl3.0軟件包進行

8、統(tǒng)計學處理.當雙側檢驗的p<0.05認為有顯著性差異. 結果 1.Ems A組和B組腹腔液CD14<'+>、CD126<'+>及CD14<'+>/CD126<'+>的表達均顯著高于對照組(P<0.05),其中Ems A組略高于Ems B組,但無統(tǒng)計學意義(P>0.05). 2.腹腔液CD14<'+>、CD126<'+>及CD14<'+>/CD126<'+>的表達密切相關,CD14<'+>與CD126<'+>,CD

9、14<'+>與CD14<'+>/CD126<'+>以及CD126<'+>與CD14<'+>/CD126<'+>之間均顯示明顯的直線相關,相關系數分別為0.657,0.698和0.991.(p<0.05). 3. 對照組、Ems A組和Ems B組中CD126<'+>/CD14<'+>細胞占CD14<'+>細胞的百分率分別為81.74﹪,84.85﹪和85.867﹪,呈逐步上升趨勢;而其占CD126<'+>細胞的百分率分別為98.

10、91﹪,98.86﹪和98.61﹪,均接近99﹪. 4.腹腔液中的IL-6含量Ems A組和Ems B組顯著高于對照組(P<0.05),而腹腔液中的sIL,-6R含量Ems B組顯著高于Ems A組和對照組(P<0.05). 5.血漿中的IL-6含量Ems B組顯著高于Ems A組和對照組(JF<0.05),而血漿中的sIL-6R含量Ems B組顯著低于Ems A組和對照組(P<0.05). 6.IL-6的含量升

11、高與腹腔液CD14<'+>、CD126<'+>及CD126<'+>/CD14<'+>表達的升高保持一致性,但無明顯的直線相關關系. 7.Ems B組患者腹腔液slL-6R含量升高,與腹腔液中IL-6含量的升高之間顯示不一致性. 8.Ems B組患者腹腔液slL-6R含量顯著高于A組和對照組(P<0.05),而其血漿中sIL-6R含量卻顯著低于A組和對照組(P<0.05),顯示一定的負性相關關系. 結論 1

12、.Ems患者腹腔液CD14<'+>表達顯著增加,提示巨噬細胞參與Ems的發(fā)生發(fā)展. 2.IL-6可能通過與腹腔液巨噬細胞膜表面的.mlL-6R結合來發(fā)揮其生物學作用. 3.活化的腹腔液巨噬細胞既是腹腔液IL6的主要來源細胞,又是IL-6的主要作用細胞,巨噬細胞可能通過自分泌的方式增加其分泌的IL-6,促進了Ems的發(fā)生發(fā)展. 4.B組Ems患者腹腔液中sIL-6R明顯升高,提示腹腔液slL-6R參與Ems的發(fā)病機