苯磷硫胺對體外高糖培養(yǎng)的牛視網膜微血管內皮細胞作用的研究.pdf

1、目的：研究苯磷硫胺(Benfotiamine)對體外高糖環(huán)境中培養(yǎng)的牛視網膜毛細血管內皮細胞的生長及細胞凋亡的影響。為探討苯磷硫胺對體外高糖環(huán)境中培養(yǎng)的牛視網膜毛細血管內皮細胞的保護作用及其機理提供初步的實驗依據。 方法：體外培養(yǎng)牛視網膜毛細血管內皮細胞。取第4-6代細胞分成三大組，均培養(yǎng)于含30mmol/L葡萄糖的DMEM培養(yǎng)基中。每大組又分成五個小組，分別給予五種不同濃度的苯磷硫胺(0、25μmol/L、50μmol/L、7

2、5μmol/L、10μmol/L)，三個大組的細胞分別在37℃恒溫箱中培養(yǎng)24小時、48小時和72小時。1.采用MTT法觀察不同濃度的苯磷硫胺對高糖培養(yǎng)的牛視網膜毛細血管內皮細胞的增殖的影響。重復上述實驗8次，對同組不同濃度所獲得的數據進行統(tǒng)計學分析；對比觀察并分析三個不同培養(yǎng)時段的結果，對不同時間組而同濃度的數據進行組間統(tǒng)計學分析。選取有明顯統(tǒng)計學意義的最小的濃度。2.用流式細胞分析技術觀察選定濃度的苯磷硫胺對高糖環(huán)境中培養(yǎng)的牛視網膜

3、毛細血管內皮細胞的凋亡的影響。 結果：MTT法顯示，一定濃度的苯磷硫胺可以降低高糖對牛視網膜毛細血管內皮細胞生長的抑制作用，且呈劑量相關。在濃度為75μmol/L時OD值具有統(tǒng)計學顯著性差異(P＜0.01)。但苯磷硫胺對牛視網膜毛細血管內皮細胞的保護作用與時間之間的關系無明顯統(tǒng)計學差異。流式細胞分析技術顯示，75μmol/L的苯磷硫胺可明顯減少牛視網膜毛細血管內皮細胞的凋亡。 結論：一定濃度的苯磷硫胺對體外高糖環(huán)境中培養(yǎng)